花生抗白绢病鉴定技术规程DB21T 4355-2025.docxVIP

ICS65.020.20CCSB05

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辽宁省地方标准

DB21/T4355—2025

花生抗白绢病鉴定技术规程

RuleforevaluationofresistancetopeanutstemrotcausedbySclerotiumrolfsii

2025-12-16发布

2026-01-16实施

辽宁省市场监督管理局发布

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DB21/T4355—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：沈阳农业大学。

本文件主要起草人：黄玉茜、丁奥、高洁、韩迪、田培聪、王趁、刘闯、杜思彤、王雯睿。

本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：沈阳市和平区太原北街2号，联系电话：024

文件起草单位通讯地址：沈阳市沈河区东陵路120号，联系电话：024

DB21/T4355—2025

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花生抗白绢病鉴定技术规程

1范围

本文件规定了花生抗白绢病鉴定的准备、接种、调查、抗病性评价和鉴定结果汇总等技术内容。本文件适用于花生白绢病抗性的鉴定及评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4407.2经济作物种子第2部分：油料类

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4准备

4.1培养基

4.1.1PDA培养基

称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加入1000mL水，煮沸20min～30min，纱布过滤，补水至1000mL，加入15g琼脂和20g葡萄糖，搅拌均匀后分装至250mL三角瓶，121℃高压灭菌20min。

4.1.2燕麦片培养基

称取20g燕麦片于500mL三角瓶内，加入10mL水搅拌至燕麦片呈湿润状态，121℃高压灭菌20min。

4.2接种物

4.2.1病原物分离

从具有白绢病典型症状的花生植株上收集茎秆基部的菌核，将收集到的菌核用75%乙醇处理30s，再用30%次氯酸钠表面消毒2min，将消毒后的菌核用无菌水冲洗后于无菌环境中自然风干，将风干后的菌核置于PDA平板培养基表面，于25℃培养箱内培养至菌核萌发，产生菌丝。花生白绢病症状见附录B。

4.2.2病原物鉴定

观察菌丝和菌核形态，使用rDNA-LSU基因片段引物进行PCR扩增测序，鉴定为齐整小核菌

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DB21/T4355—2025

（SclerotiumrolfsiiSacc.），经致病性测定后确定为供接种菌株。花生白绢病菌丝和菌核形态见附录A。

4.2.3病原物保存

在4℃条件下保存菌株，或用20%的甘油溶液于-40℃条件下长期保存，备用。

4.2.4接种物繁殖

菌株接种于PDA培养基上，25℃下培养至长出菌丝。从菌落边缘取菌饼转移至燕麦片培养基上，置于25℃培养箱中培养至菌丝长满所有燕麦片，备用于接种。

4.3鉴定植株培养

4.3.1室内

选用长10cm×宽10cm×高8cm的花盆播种籽粒饱满的花生种子4粒，保苗3株。每个品种播种3盆，置于人工气候箱内培养，培养条件为：温度28℃/23℃（昼/夜）、光周期16h/8h（昼/夜）、光照强度400μmol/(m2·s)～600μmol/(m2·s)、相对湿度60%～70%，定期浇水。种子质量应符合GB4407.2的规定。

4.3.2田间

4.3.2.1圃地选择

选择地势平坦、地力均匀、排灌方便，具备良好自然发病条件的地块。

4.3.2.2试验设计

单个小区面积3m×4.2m，按随机区组排列。在单个小区内，每个鉴定材料种植7行，单粒播种，保苗100株，设3次重复。鉴定材料播种时间、耕作管理方式与生产田相同。

5接种

5.1室内

5.1.1接种时期以4叶期为宜。

5.1.2接种方法

采用燕麦埋土接种法。每个品种接种9株，将培养好的带菌燕麦片（接种物）埋入