高中高一生物DNA的复制课件.pptxVIP

第一章DNA复制：生命的延续第二章DNA复制中的酶学机制第三章DNA复制中的结构调控第四章DNA复制中的错误修复第五章DNA复制：变异与进化第六章DNA复制：未来展望

01第一章DNA复制：生命的延续

DNA复制的基本特征半保留复制1958年，Meselson-Stahl实验证实DNA复制为半保留复制，即新合成的DNA链一条来自亲代，一条来自新合成。双向复制单个DNA分子上，复制起始点（oriC）启动后，形成两个复制叉沿解旋方向移动，确保复制效率。复制叉的动态平衡复制叉速度受多种因素影响，如解旋酶活性、模板质量等，动态平衡确保复制过程顺利进行。复制起始与终止真核生物复制起始需ORC-CDC6-ATM复合体调控，终止区含TTAGGG重复序列，需端粒酶延长以补偿丢失。复制压力与调控复制压力通过ATM/ATR检查点调控，如损伤或停滞时，启动G1/S或S期检查点，确保复制完整性。复制叉的停滞与修复停滞的复制叉需RPA、ATR等蛋白识别，招募ATM/ATR激酶启动检查点反应，避免基因组不稳定。

DNA复制酶的种类与功能DNA聚合酶DNA聚合酶III为主复制酶，具5→3聚合和3→5外切酶活性，延伸速度约1000nt/s。复制叉结构复制叉由解旋酶、引物酶、DNA聚合酶III等酶类协同作用，确保复制效率和解旋稳定性。

复制过程的时间轴与调控复制起始阶段复制延伸阶段复制终止阶段ORC-CDC6-ATM复合体识别oriC，招募解旋酶。MCM复合体由CDC28激酶磷酸化后，解旋DNA供复制酶结合。复制起点活性受基因位点调控，如基因启动子区常具高复制活性。复制叉形成后，引物酶合成RNA引物，DNA聚合酶III延伸。冈崎片段合成时，RNA引物被切除，由DNA聚合酶I填补，最终由连接酶缝合。复制叉迁移速度受多种因素影响，如酶类活性、模板质量等。冈崎片段连接酶缝合不连续链，如人类WAPL介导的。复制终止区含TTAGGG重复序列，需端粒酶延长以补偿丢失。复制压力通过ATM/ATR检查点调控，确保复制完整性。

复制叉的动态平衡与调控复制叉的动态平衡是确保DNA复制精确性的关键。在复制过程中，复制叉的速度和稳定性受到多种因素的调控。首先，解旋酶的活性直接影响复制叉的迁移速度。例如，E.coli的UmuD2C解旋酶通过ATP水解能量破坏氢键，使DNA双螺旋解开。解旋酶的活性受模板质量的影响，如AT富集区比GC区更容易被解开，因此复制叉在AT富集区移动速度更快。其次，复制叉的迁移速度还受到模板质量的影响。例如，DNA聚合酶III在模板质量较差时，会减慢延伸速度，以避免错误复制。此外，复制叉的动态平衡还受到复制叉停滞和修复机制的调控。当复制叉遇到损伤或停滞时，会招募RPA、ATR等蛋白识别，并启动检查点反应，确保复制完整性。例如，RPA蛋白可以结合单链DNA暴露区域，阻止复制叉继续移动，并招募ATR激酶启动检查点反应，激活p53和G1/S检查点，使细胞周期停滞，以便修复损伤。总之，复制叉的动态平衡和调控机制确保了DNA复制的精确性和效率，是生命延续的重要保障。

02第二章DNA复制中的酶学机制

解旋酶的分子动力学解旋酶与DNA相互作用E.coliUmuD2C通过α-螺旋与DNA结合，解旋效率随AT含量增加而提高。例如，实验显示，AT富集区比GC区解旋速率快50%。ATP水解驱动解旋酶氨基末端形成核苷酸结合位点，水解ATP时螺旋构象变化，推动DNA分离。冷冻电镜结构显示，其催化循环中Mg2?从E位点转移至核苷酸结合位点。解旋酶调控负超螺旋通过拓扑异构酶Ⅰ（TopoⅠ）提供解旋力。例如，E.coliTopoⅠ可松弛DNA，使解旋酶顺利进入，其抑制剂如Illuminomycin导致复制停滞。解旋酶的进化保守性从细菌到古菌，解旋酶同源物结构相似，提示RNA合成机制古老。例如，嗜热菌的UmuD2C需更稳定的结构以应对高温环境。解旋酶的错误修复解旋酶错误解旋可能导致基因组不稳定，如E.coliumuD2C突变体复制效率下降。

引物酶的RNA合成策略引物修复机制引物合成错误时，由BER系统修复。例如，人类OGG1识别8-oxoG，通过RNaseH切除RNA引物，由DNA聚合酶β填补空隙。引物酶调控引物酶活性受多种调控机制影响，如Cdt1蛋白的抑制。例如，Cdt1蛋白可被Cyclin-E-Cdk2降解释放DnaG。引物酶进化保守性从细菌到古菌，DnaG同源物结构相似，提示RNA合成机制古老。例如，嗜热菌的DnaG需更稳定的结构以应对高温环境。

DNA聚合酶的校对功能3→5外切酶活性校对机制校对缺陷DNA聚合酶IIIε亚基具校对功能，如发现错配碱基，可退回3个核苷酸校对。例如，实验显示，该校对效率约1000倍于初始聚合，降低突变率至10??/nt。校对