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壳低聚糖及氨基葡萄糖与角蛋白相互作用的体外机制解析与应用探索

一、引言

1.1研究背景与意义

在现代药物治疗领域，透皮给药系统（TransdermalDrugDeliverySystem，TDDS）凭借其独特优势，正逐渐成为药物研发和应用的重要方向。透皮给药系统是指在皮肤或黏膜表面给药，使药物以恒定速度通过皮肤各层或黏膜，进入体循环进行治疗的给药系统。与传统的口服和注射给药方式相比，透皮给药系统具有多方面的显著优势。它能避免药物的肝首过效应，减少药物在肝脏中的代谢和失活，从而提高药物的生物利用度；可以维持恒定的血药浓度，减少药物浓度的波动，降低毒副作用；还能延长药物的作用时间，减少给药次数，提高患者的依从性，尤其适合需要长期用药的患者。对于一些难以口服或注射的药物，透皮给药提供了新的给药途径。在疼痛管理、心血管疾病、激素治疗和戒烟等多个治疗领域，透皮贴剂已得到广泛应用。比如，芬太尼透皮贴剂用于中重度慢性疼痛的治疗，通过持续释放芬太尼，为患者提供长效的镇痛效果；雌二醇贴片则可减轻绝经引起的症状，帮助女性平稳度过特殊生理时期。

然而，皮肤作为人体最大的器官，是一道天然的屏障，其角质层对药物的透皮吸收构成了主要障碍。角质层由致密的角质化无生命细胞层层叠叠组成，形成了高密度和低含水量的结构，这种结构能够有效阻碍药物的渗透，限制了药物的生物利用度。据统计，大多数药物的透皮扩散速率极低，无法满足临床治疗的需求，甚至部分药物根本无法透过皮肤。这使得透皮给药系统的发展面临巨大挑战，也限制了其在更多药物和疾病治疗中的应用。

为了克服皮肤角质层的屏障作用，提高药物的透皮吸收效率，透皮促进剂应运而生。理想的透皮促进剂应具备多种特性，如具有药理活性、无毒、无刺激性、无变态反应、起效迅速、作用时间可预测、适用于选择的药物、撤去后角质层屏障功能能迅速并全部恢复、皮肤屏障功能只能单向降低且内源性物质不能通过皮肤扩散损失、与药物及基质无配伍禁忌、在皮肤上易于铺展且无不适感、价廉、无嗅、无色、无味等。但实际上，完全符合这些条件的促进剂几乎不存在。目前已开发的新型透皮促进剂种类繁多，包括亚砜类（如二甲基亚砜）、吡咯酮类（如2-吡咯酮、5-甲基-2-吡咯酮）、氮酮（Azone）及其类似物、脂肪酸及其脂（如油酸、月桂酸）、表面活性剂、醇类、多元醇类（丙二醇、丙三醇）、萜稀类（如薄荷油）、胺及酰胺类（如尿素）、磷脂类（如卵磷脂）、糖类（如环湖精）、氨基酸类、大环化合物类等。但这些传统的透皮促进剂都存在一定的问题，其中最突出的是皮肤刺激性和毒性。例如，二甲基亚砜、二甲基乙酰胺等化合物因毒性问题已在欧美被禁止用于临床药物；氮酮虽然应用较为普遍，但也具有一定的毒性，临床使用时对其用量有严格限制，一般不能超过10％（重量），最好不要超过6％（重量），并且它还存在发挥作用较慢、迟滞时间较长、对亲脂性药物的促渗性较差等缺点。传统的脂质体、磷脂类促进剂，辣椒素、萜稀类、薄荷醇、挥发油等中药提取物，氨基酸类促进剂虽然毒性有所降低，但应用不具普遍性，对许多药物尤其是亲脂性药物的促渗性能并不理想。

壳低聚糖类化合物作为一类具有独特生理活性的物质，在药物透皮吸收领域展现出了巨大的潜力。壳低聚糖是壳聚糖经水解后产生的一类低聚合度（n一般在2-20）可溶于水的氨基糖类化合物，由N-乙酰-D-氨基葡萄糖（GLcNAc）和D-氨基葡萄糖（GLEN）通过β-1，4糖苷键连接起来。它具有高效无毒的生理活性，生物相容性和细胞相容性良好，对皮肤无刺激过敏反应、无结构损害、无药理活性。已有相关研究表明，壳低聚糖能够有效促进药物的透皮吸收，但其作用机制尚未完全明确。深入研究壳低聚糖及相关化合物与皮肤角质层主要成分角蛋白的相互作用，对于揭示其促进药物透皮吸收的机制，开发高效、安全的透皮给药系统具有重要的理论和实际意义。通过探究它们之间的相互作用，可以更好地理解壳低聚糖如何影响角蛋白的结构和性质，进而为优化透皮促进剂的设计和应用提供科学依据，推动透皮给药技术的发展，为患者提供更有效的治疗手段。

1.2研究目的与内容

本研究旨在深入探究壳低聚糖及氨基葡萄糖与角蛋白的相互作用，为揭示壳低聚糖类化合物作为透皮促进剂的作用机制提供坚实的理论基础。具体研究内容如下：

角蛋白的提取与表征：采用以β-巯基乙醇为还原剂，尿素为蛋白质变性剂，十二烷基硫酸钠为蛋白质稳定剂的混合体系，从人发中提取角蛋白。通过对提取过程中各因素的优化，如反应前溶胀时间、尿素浓度、β-巯基乙醇和十二烷基硫酸钠（SDS）的加入量以及反应温度和时间等，确定最佳提取条件，以获得较高的人发溶解率和稳定的角蛋白溶液。对提取得到的角蛋白进行全面表征，包括测定其在不同溶剂中的溶