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根据各型别HLA核苷酸碱基序列差异,设计出一套HLA等位基因的序列特异性引物,对待测DNA进行PCR扩增,因TaqDNA聚合酶没有3′→5′核酸内切酶活性,引物3′端最后一个碱基是否与模板配对决定着能否扩增出产物。若将引物的3′端最后一个碱基设计在正好有差异的那个碱基序列上,则扩增产物仅需常规琼脂糖电泳,根据特异产物存在与否即可直接对HLA进行分型。用PCR扩增特定的靶序列,经变性使之成为两条单链,然后在无变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳。单链DNA如果存在碱基差异,即使一个碱基的不同,也会表现出电泳迁移率的不同,据此可将不同型别的HLA区分开,达到
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