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自动旋光仪的使用方法

一、仪器结构与工作原理概述

自动旋光仪是利用旋光现象测量物质旋光度的精密光学仪器，核心结构包括光源系统、偏振系统、样品检测系统和数据处理系统四大部分。光源通常采用钠光灯（波长589.3nm，即“D线”），其发出的自然光经起偏镜后变为线偏振光；当偏振光穿过具有旋光性的样品时，振动方向会发生旋转，旋转角度即为旋光度（α）；检偏镜通过电机驱动自动调整角度，直至与旋转后的偏振光方向匹配，最终由光电探测器将光信号转换为电信号，经数据处理后直接显示旋光度、比旋度等结果。

二、实验前准备工作

1.样品制备

旋光性物质的旋光度受浓度、温度、溶剂等因素影响，制备样品时需严格控制以下参数：

浓度：根据物质的旋光能力调整浓度（如蔗糖溶液通常配制成10%~20%），确保旋光度在仪器测量范围内（一般为±45°），浓度过高易导致读数超出量程，过低则误差增大。

溶剂选择：优先使用无旋光性的溶剂（如蒸馏水、乙醇），若需使用混合溶剂，需在实验记录中注明溶剂种类及比例。

温度控制：旋光度随温度变化显著（多数物质温度系数为-0.01°~-0.04°/℃），需将样品置于恒温水浴中，待温度稳定至实验要求（通常为20℃或25℃）后再测量。

样品澄清度：样品需完全溶解且无浑浊、气泡，若有悬浮物需用0.45μm滤膜过滤，气泡则需轻轻振荡或静置排除（若气泡附着在样品管内壁，可将样品管倾斜旋转，使气泡浮至液面上方）。

2.仪器检查与校准

外观检查：确认仪器外壳无破损，电源插头、数据线连接牢固，样品室门开关顺畅。

光源预热：打开电源后，钠光灯需预热15~30分钟，直至光线稳定（若出现闪烁或熄灭，需关闭仪器重新启动，避免频繁开关损坏光源）。

零点校准：将空样品管（或装满溶剂的样品管）放入样品室，盖上盖子，按下“清零”键，待仪器显示“0.000°”后完成零点校准。若零点偏差较大（如超过±0.05°），需检查样品管是否洁净、仪器是否水平（可通过底部水平泡调整），必要时使用标准石英旋光管重新校准。

三、样品管的使用规范

1.样品管选择

自动旋光仪配套的样品管通常有100mm、200mm、220mm等长度（以管内光程为准），选择原则为：

旋光能力强的物质（如葡萄糖）选短管（100mm），避免旋光度超出量程；

旋光能力弱的物质（如某些药物中间体）选长管（220mm），提高测量灵敏度。

2.样品管操作步骤

清洗：使用前用蒸馏水冲洗样品管3~5次，若样品为油性物质，需先用乙醇冲洗，再用蒸馏水洗净，最后用少量样品溶液润洗2次（避免残留溶剂稀释样品）。

装样：将样品管一端的橡胶垫和玻璃片盖好，用橡皮筋固定（注意玻璃片需完全覆盖管口，无偏移），然后将样品管倾斜45°，缓慢倒入样品溶液，直至液面高于管口（约1~2mm），避免产生气泡；再将另一端的玻璃片和橡胶垫盖好，轻轻旋转样品管，使气泡浮至液面上方（若样品管有“气泡线”标记，需将气泡对准标记位置，减少对光路的影响）。

擦拭：用镜头纸轻轻擦拭样品管外壁的残留溶液（禁止使用滤纸或纱布，以免刮伤玻璃），确保管壁干燥、透明。

放置：将样品管两端的定位标记（如刻线）对准样品室的定位槽，轻轻推入样品室，确保样品管与光路同轴（若样品管倾斜，会导致光程变化，影响读数准确性）。

四、正式测量操作流程

1.常规测量步骤

设置参数：在仪器操作面板上选择测量模式（旋光度α、比旋度[α]或浓度c），输入样品管长度（单位：dm）、样品浓度（单位：g/mL）或溶剂密度（若需计算比旋度），温度补偿功能可根据实验要求开启（若仪器无自动温度补偿，需手动记录温度并计算校正值）。

空白校正：将装有溶剂的样品管放入样品室，按下“空白测量”键，仪器自动记录空白值（即溶剂的旋光度，通常接近0°），并在后续样品测量中自动扣除。

样品测量：取出空白样品管，放入制备好的样品管，关闭样品室门，按下“测量”键，仪器将自动完成检偏镜角度调整、数据采集和计算，约5~10秒后显示结果（若需多次测量，可设置“重复测量次数”为3~5次，仪器将自动计算平均值）。

数据记录：记录测量结果（包括旋光度、比旋度、测量温度、样品管长度、浓度等），若仪器支持打印功能，可直接打印数据报表。

2.特殊样品测量注意事项

深色样品：若样品颜色较深（如酱油、中药提取液），会吸收部分偏振光，导致光电探测器灵敏度下降，需适当增加样品浓度或选择短样品管，同时延长测量时间（让仪器充分采集光信号）。

易挥发样品：如乙醇溶液、乙醚溶液，需在装样后立即测量，避免溶剂挥发导致浓度变化，测量完成后及时盖紧样品管盖子。

动态反应样品：若需跟踪反应过程中旋光度的变化（如蔗糖水解反应），需将样品管与恒温水浴连接，保持温度稳定，并设置仪器为“连续测量模式”，每隔一定时间记录一次数据。

五、常见问题与解决方法

1.读数不稳定或跳动