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ICS
CCS
65.020.01B16
15
内蒙古自治区地方标准DB15/T3435—2024
燕麦炭疽病品种抗性室内鉴定技术规程
Technicalcodeofpracticeforresistanceidentificationto
anthracnoseofoatvarietyingreenhouse
2024-05-31发布2024-07-01实施
内蒙古自治区市场监督管理局发布
I
DB15/T3435—2024
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会(SAM/TC20)归口。
本文件起草单位:内蒙古农业大学、乌兰察布市农林科学研究所。
本文件主要起草人:东保柱、周洪友、孟焕文、张笑宇、王振、王凤梧、郑成忠、徐振朋、张子臻、杨继峰、郭果枝、苗俊侠、王剑、赵燕。
DB15/T3435—2024
1
燕麦炭疽病品种抗性室内鉴定技术规程
1范围
本文件规定了燕麦炭疽病品种抗性室内鉴定技术中所需的材料准备、接种方法、调查和统计方法和抗性评价标准等内容。
本文件适用于燕麦品种、品系、种质资源对炭疽病的室内抗性鉴定或病原菌的致病性测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
DB15/T2110高粱炭疽病抗性鉴定技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
燕麦炭疽病oatanthracnose
燕麦炭疽病由禾生炭疽菌(ColletotrichumcerealeManns)侵染燕麦引起的病害。
4材料准备
4,1培养基
PDA培养基。
PDA-燕麦秸秆培养基:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉18g,新鲜燕麦秸秆20g。将马铃薯切成1cm3小块,燕麦秸秆剪成1cm长的小段,用蒸馏水煮沸20min,浸出液将葡萄糖、琼脂粉充分溶解;121℃高压湿热灭菌20min,冷却至55℃,制作培养基平板。
4.2病原菌分离和接种体制备
燕麦禾生炭疽菌的分离、培养,按照DB15/T2110执行。
分离得到的菌株接种于PDA平板,25℃黑暗条件下培养5d。用直径为5mm的打孔器取边缘菌丝,接种于PDA-燕麦秸秆培养基中,25℃黑暗条件下培养5d后,按照标准DB15/T2110进行诱导产孢。在诱导产孢的平板培养基中加入10mL无菌水,洗下分生孢子,并用无菌水调整孢子浓度到1×106个/mL,将孢子悬浮液作为接种材料。
4.3燕麦幼苗的准备
2
DB15/T3435—2024
点种前,用5倍于种子体积的50℃~55℃热水浸种15min~20min,或用0.3%~0.5%的次氯酸钠溶液浸泡15min,或40%过氧乙酸80倍液浸泡30min。浸泡过程中不断搅拌。
在直径为12.5cm培养皿中铺上4层湿润纱布;将燕麦种子在纱布上平铺一层,种子上覆盖4层湿润纱布;培养皿置于25℃、80%RH、黑暗条件下催芽24h。
在口径为10cm的营养钵中装入2/3体积的营养基质,并浇透水,每钵中播撒催芽后的燕麦种子20粒,置于25℃/16h光照、22℃/8h黑暗条件下培养,光照强度90μmol·m-2·s-1。培养30d后,燕麦幼苗可用于抗性鉴定。
5接种方法
将孢子悬浮液均匀喷雾到30d苗龄的燕麦植株上,接种后燕麦植株置于密闭不透光的塑料桶中,桶中加入深度为1cm的水保湿,室温23℃,黑暗处理24h后,置于25℃、16h光照,22℃、8h黑暗条件下培养30d,培养完成后观察发病情况。
6调查和统计方法
燕麦炭疽病发生时病斑沿叶脉呈梭形。喷雾接种的燕麦植株在培养30d后调查第2和第3片叶的病斑面积,每个品种调查50株燕麦。
按照附录A表A.1燕麦抗炭疽病室内鉴定病情级别划分标准确定发病级别,将调查结果记录在附录B表B.1燕麦抗炭疽病鉴定结果调查表中,并计算病情指数(DI)。
DI=×100………………(1)
式中:
DI——病情指数;
Ni——各级别的病株数;
Li——相应致病级;
N——调查总株数;
L——最高致病等级。
7抗性评价方法
按照附表
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