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植物双功能基因组编辑系统构建及小麦抗赤霉病种质创新研究

一、引言

1.1研究背景与意义

粮食安全始终是关系国家经济发展、社会稳定和人民福祉的全局性重大战略问题。习近平总书记强调，“中国人的饭碗任何时候都要牢牢端在自己手上”，凸显了保障粮食供应稳定的极端重要性。从国家稳定角度看，充足的粮食供应是社会和谐稳定的基石，历史上多次因粮食危机引发社会动荡，足以证明粮食安全对政权稳固的关键作用。在经济发展层面，粮食是基础产业，其安全直接影响农业产业的健康发展，进而关联到整个国民经济的稳定与繁荣。从人民生活质量角度而言，粮食的充足与安全直接关系到民众的身体健康和生活品质，是满足人民对美好生活向往的基本前提。

小麦作为世界主要粮食作物之一，在全球粮食供应中占据举足轻重的地位。然而，小麦赤霉病（Fusariumheadblight，FHB）的肆虐给小麦生产带来了严重威胁。小麦赤霉病是由多种镰刀菌引起的世界性病害，在中国主要由禾谷镰刀菌和亚洲镰刀菌导致，尤其在淮河以南及长江中下游麦区，发病情况尤为严重。这种病害不仅造成小麦产量大幅下降，一般可导致减产10%-30%，严重时甚至高达80%-90%，甚至颗粒无收，还会使小麦籽粒品质恶化，降低出粉率和面粉质量。更为严峻的是，赤霉病菌会在麦粒中产生脱氧雪腐镰菌醇（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）等真菌毒素，这些毒素对人畜健康危害极大，可引发发热、呕吐、腹泻等中毒症状，长期摄入还具有致癌、致畸和诱变风险，严重时会导致死亡。

当前，防治小麦赤霉病主要依赖化学药剂，但这不仅会增加生产成本，还可能对环境造成污染，长期使用还会使病原菌产生抗药性，导致防治效果逐渐下降。选育和推广抗赤霉病小麦品种被认为是解决这一问题最经济、有效和环保的方法。然而，传统育种方法存在周期长、效率低等局限性，难以满足快速应对赤霉病危害的需求。随着生物技术的飞速发展，基因组编辑技术为小麦抗赤霉病种质创制提供了新的契机。植物双功能基因组编辑系统能够在对目标基因进行编辑的同时，实现对基因表达的调控，为精准改良小麦赤霉病抗性提供了强大工具。通过该系统，有望打破传统育种瓶颈，快速、高效地创制出具有高抗赤霉病能力的小麦新种质，为保障小麦安全生产和粮食安全提供坚实的技术支撑和种质资源储备。

1.2国内外研究现状

1.2.1植物基因组编辑技术发展

基因组编辑技术作为一种新兴的、能够较为精确地对生物体基因组特定目标基因进行修饰的基因工程技术，近年来取得了飞速发展。第一代基因组编辑技术主要包括锌指核酸酶（ZFN）技术，它利用锌指蛋白识别并结合特定DNA序列，再通过核酸酶结构域对DNA进行切割，从而实现基因编辑。但ZFN技术存在构建复杂、成本高以及脱靶效应等问题。第二代转录激活因子样效应物核酸酶（TALEN）技术，通过设计TALEN蛋白来特异性识别和切割目标DNA序列，在一定程度上解决了ZFN技术构建复杂的问题，但仍然操作繁琐，限制了其广泛应用。

CRISPR/Cas基因编辑系统作为第三代基因组编辑工具，自2012年问世以来，凭借其高效、准确的基因组定点编辑能力，在全球范围内得到了广泛应用和深入研究。该系统利用一段与目标DNA互补的引导RNA（gRNA）将Cas蛋白引导至特定基因组位点，然后Cas蛋白对DNA进行切割，引发细胞内的DNA修复机制，实现基因敲除、插入或替换等编辑操作。CRISPR/Cas系统不断被优化和扩展，衍生出多种新型编辑技术。例如，碱基编辑器能够在不产生双链断裂的情况下实现单碱基的精准替换，极大地拓展了基因编辑的范围和精度；引导编辑器则可以实现更灵活的DNA序列编辑，包括碱基的插入、缺失和替换等，为基因功能研究和作物遗传改良提供了更为强大的工具。

在植物基因组编辑技术应用方面，国内外科研人员取得了丰硕成果。通过CRISPR/Cas9技术，成功对水稻、小麦、玉米等多种重要农作物的基因进行编辑，实现了对作物抗病性、抗逆性、品质和产量等重要农艺性状的改良。在抗病性改良方面，利用CRISPR/Cas9技术敲除小麦中的感病基因，获得了对条锈病具有抗性的小麦新种质；在水稻中，通过编辑相关基因，增强了水稻对稻瘟病的抗性。在品质改良方面，对玉米淀粉合成相关基因进行编辑，改善了玉米淀粉的品质；在番茄中，通过基因编辑调控果实色素合成基因，实现了番茄果色的定制。

在植物基因组编辑技术的发展历程中，美国、中国等国家处于领先地位。美国在基础研究和技术创新方面成果显著，率先开展了多项前沿研究，推动了基因组编辑技术的不断突破。中国在植物基因组编辑技术的应用研究方面进展迅速，近年来在作物遗传改良领域取得了众多重要成果，发表的相关研究论文数量在全球名列前茅。

1.2.2双功能基