CN112602597A 一种获得工业大麻全雌性或全雄性种苗的方法 （济南浩隆生物科技有限公司）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN112602597A

(43)申请公布日2021.04.06

(21)申请号202011642236.7

(22)申请日2020.12.31

(71)申请人济南浩隆生物科技有限公司

地址250000山东省济南市高新区颖秀路

2766号北楼426室

(72)发明人李成刚贾永玲

(74)专利代理机构济南知来知识产权代理事务所(普通合伙)37276

代理人曹丽

(51)Int.CI.

A01H4/00(2006.01)

权利要求书1页说明书5页附图2页

(54)发明名称

一种获得工业大麻全雌性或全雄性种苗的方法

(57)摘要

CN112602597A本发明公开了一种获得工业大麻全雌性或全雄性种苗的方法，(1)单性外植体的培养、获取，大麻开花季节，从健壮的雌性植株上选取顶端茎段，用消毒后的剪刀把顶部8-12cm的茎段剪切下来消毒；(2)外植体材料灭菌；(3)灭菌后材料的培养；(4)分化培养；(5)继代扩繁培养；(6)生根培养；(7)温室驯化。该方法首次明确选用确定雌雄株后的带芽的嫩梢做外植体，所获得的试

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CN112602597A权利要求书1/1页

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1.一种获得工业大麻全雌性或全雄性种苗的方法，其特征是：包括以下步骤：

(1)单性外植体的培养、获取

大麻开花季节，从健壮的雌性植株上选取顶端茎段，用消毒后的剪刀把顶部8-12cm的茎段剪切下来消毒；

(2)外植体材料灭菌

先用流水冲洗，再用新洁尔灭浸泡，洗净后剪成茎段后进行消毒处理：无菌水震荡冲洗，75%的酒精震荡冲洗，无菌水震荡冲洗2～5min,0.1%的氯化汞溶液，滴入2～5滴吐温80,震荡冲洗，无菌水震荡；

(3)灭菌后材料的培养

将消毒后的茎段用剪去伤口，将茎段剪成带有1-2个芽的茎段，接种于空白MS培养基中，接种完的外植体放置于培养间，进行培养；

(4)分化培养

将步骤3培养后带有幼芽的茎段，用手术剪剪去下端，然后插入到分化培养基中，分化培养基配方如下：MS+0.5～1.2mg·L16-BA+0.2～0.5mg·L?1ZT+0.1～0.5mg·L1KT+25g·

L?1蔗糖+5g·L?1琼脂粉(琼脂粉凝胶强度为1300g/cm2);将接种后的幼苗放置于培养间培养；优选的：培养条件：温度25℃±1℃,湿度30%-50%,光照强度25001x-40001x,光照时间14h-16h,培养周期25-30d。

(5)继代扩繁培养

分化培养结束后，幼苗转接到继代培养基中进行继代扩繁培养；继代扩繁培养基为：

MS+0.2～1.0mg·L?16-BA+0.3～1.5mg·L?1IAA+0.1～0.5mg·L?1ZT+0.1～0.2mg·L1KT+25g·L?1蔗糖+5g·L?1琼脂粉；

(6)生根培养

将4cm以上健壮的幼苗分成单棵，接到生根培养基中；生根培养基如下：WH+0.1~1.0mg·L1IAA+0.05～0.5mg·L1NAA+30g·L?1蔗糖+5g·L?1琼脂粉(琼脂粉凝胶强度为1300g/cm2)+0.2g·L1活性炭；

(7)温室驯化

当80%幼苗根长度大于3cm时，进行洗苗并定植到50孔的穴盘内，基质配比为草炭：珍珠岩：蛭石=5-7:1-2:0.5-1,35天左右就可获得能定植到大田全雌或全雄工业大麻种苗。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤(4)培养条件如下：温度25℃±1℃,湿度30%-50%,光照强度25001x-40001x,光照时间14h-16h;20-25d转瓶继续培养，直至分化出新芽。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤(5)培养条件如下：培养条件：温度25℃±2℃,湿度30%-60%,光照强度25001x-50001x,光照时间14h-17h,培养周期25-35d。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤(6)培养条件如下：温度25℃±2℃,湿度35%-60%,光照强度2500-45001x,光照时间14-16h。培养25-35d,便可有根生出。

5.权利要求1-4任一所述的方法培育得到的工业大麻全雌性或全雄性种苗。

6.权利要求5所述的种苗在制备二氢大麻酚中的应用。

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