CN112730696A 一种利用hplc法检测火麻油中5种大麻酚化合物的方法 （中国标准化研究院）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN112730696A

(43)申请公布日2021.04.30

(21)申请号202110148255.2

(22)申请日2021.02.03

(66)本国优先权数据

202010967048.52020.09.15CN

GO1N30/36(2006.01)

G01N30/72(2006.01)

G01N30/86(2006.01)

(71)申请人中国标准化研究院

地址100191北京市海淀区知春路4号

(72)发明人兰韬席兴军云振宇初侨于聪聪孟玲玲张文焕

(74)专利代理机构重庆恩洲知识产权代理事务所(特殊普通合伙)50263

代理人兰渝宏

(51)Int.CI.

GO1NG01NGO1N

30/02(2006.01)

30/06(2006.01)

30/34(2006.01)

权利要求书1页说明书9页附图3页

(54)发明名称

一种利用HPLC法检测火麻油中5种大麻酚化合物的方法

(57)摘要

CN112730696A本发明属于分析化学领域，涉及一种利用高效液相色谱法(HPLC)检测火麻油中5种大麻酚类化合物的方法。所述方法采用C18色谱柱，以超纯水为流动相A、以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，样品进入检测器检测；所述大麻酚类化合物为△?-四氢大麻酚、大麻二酚、大麻酚、四氢大麻酚酸和大麻二酚酸。本发明的技术方案可为相关检测方法标准的建立奠定方法学基础，同时对于杜绝大麻酚含量超标的火麻油流入市场以及促

CN112730696A

Intensity(mV)

Intensity(mV)

Time(min)

CN112730696A权利要求书1/1页

2

1.一种利用HPLC法检测火麻油中5种大麻酚化合物的方法，其特征在于，所述方法采用C18色谱柱，以超纯水为流动相A、以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，样品进入检测器检测；所述大麻酚类化合物为^?-四氢大麻酚、大麻二酚、大麻酚、四氢大麻酚酸和大麻二酚酸。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C18色谱柱为Supersil-ODS2色谱柱；柱温为25-35℃;检测波长为200-230nm。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.5-1.5mL/min。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品的进样体积为1-10μL。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱条件如下：

0-20min,流动相A与流动相B的体积比为：30-10:70-90;

20-22min,流动相A与流动相B的体积比为：10:90;

22-24min,流动相A与流动相B的体积比为：10-30:90-70;

24-30min,流动相A与流动相B的体积比为：30:70。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括在检测前对样品进行前处理；所述前处理包括将样品加入甲醇与异丙醇的混合溶剂中涡旋混匀，然后超声并离心，取上清液过滤的操作步骤。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述混合溶剂中甲醇与异丙醇的体积比为：甲醇：异丙醇=50-80:50-20。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，将样品加入甲醇与异丙醇的混合溶液中涡旋1-10min,然后超声提取5-20min,提取液以8000-12000rpm离心1-10min,然后取上清液过

0.1-0.5μm的有机滤膜。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，将样品加入甲醇与异丙醇的混合溶液中涡旋2-5min混匀，超声提取10-15min,提取液以10000rpm离心1-5min,取上清液过0.22μm有机滤膜后待测。

10.一种分离检测火麻油中大麻酚类化合物的试剂组合物，其特征在于，所述试剂组合物采用C18色谱柱，以超纯水作为流动相A、乙腈为流动相B;所述大麻酚类化合物包括?-四氢大麻酚、大麻二酚、大麻酚、四氢大麻酚酸和大麻二酚酸中的一种或多种。

CN112730696A说明书1/9页

3

一种利用HPLC法检测火麻油中5种大麻酚化合物的方法

技