3.2基因工程的基本操作程序第1课时课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第2节基因工程的基本操作程序【本节聚焦】1.基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？2.基因工程操作的每一步涉及的技术和方法有哪些？第三章基因工程

从社会中来你知道转基因抗虫棉抗虫的机制是什么吗？培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤呢？1997年，我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年，我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个，减少农药用量40万吨，增收节支社会经济效益450亿元。非转基因抗虫棉转基因抗虫棉

从社会中来培育转基因抗虫棉的简要过程普通棉花（无抗虫特性）棉花细胞(含抗虫基因）提取抗虫棉（Bt抗虫蛋白）导入与载体拼接重组DNA分子1.目的基因的筛选与获取2.基因表达载体的构建3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定抗虫基因（Bt抗虫蛋白基因）苏云金杆菌

Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体。因此，Bt抗虫蛋白不会对人畜产生上述影响。【思考】抗虫棉中的Bt抗虫蛋白会不会对人畜产生危害？Bt抗虫蛋白的杀虫机理：当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的特异性受体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡。从社会中来

知识拓展：基因的结构基因1基因2基因3DNA片段放大基因通常是有遗传效应的DNA片段；能编码特定的蛋白质非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游能转录相应的mRNA，进一步编码（翻译）出蛋白质的DNA区段不能转录为相应的mRNA，不能编码蛋白质的区段不能转录为相应的mRNA，不能编码蛋白质的区段

1.原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚合酶识别结合位点启动子终止子编码蛋白质,连续不间断编码区：非编码区：有调控作用,上游有启动子，下游有终止子注：不能编码蛋白质的序列=非编码区

2.真核细胞的基因结构编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶识别结合位点内含子外显子启动子终止子编码区上游编码区下游外显子：能编码蛋白质的序列内含子：不能编码蛋白质的序列：有调控作用,上游有启动子，下游有终止子编码区非编码区注：不能编码蛋白质的序列=非编码区+内含子

一、目的基因的筛选与获取(1)概念：用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。如与生物抗逆性、生产药物、毒物降解、工业用酶等相关的基因。主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。资料：苏云金杆菌通过产生苏云金杆菌伴胞晶体蛋白（Bt抗虫蛋白），破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫。科学家将“杀虫基因”转入棉花中，棉花产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。(2)种类：培育转基因抗虫棉的目的基因——Bt抗虫蛋白基因（Bt基因）1.目的基因

一、目的基因的筛选与获取2.筛选合适的目的基因(1)较为有效的方法之一从相关的___________和___________的基因中进行筛选。已知结构功能清晰用苏云金杆菌制成的生物杀虫剂广泛用于防治棉花虫害对Bt基因的表达产物Bt抗虫蛋白有了较为深入的了解苏云金杆菌的杀虫作用与Bt基因有关掌握了Bt基因的序列信息Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因功能清晰已知结构实例：Bt抗虫蛋白基因（Bt基因）的筛选过程

一、目的基因的筛选与获取(2)认识基因结构和功能的技术方法利用测序技术、序列数据库（如GenBank）、序列对比工具(如BLAST)等，找到合适的目的基因。2.筛选合适的目的基因基因测序仪测定核酸和蛋白质序列测序技术美国国家生物信息中心序列数据库以碱基顺序或氨基酸残基顺序为基本内容的分子生物信息数据库核苷酸序列比对氨基酸序列比对序列比对工具把感兴趣的序列跟已经存在的序列数据库进行比较的工具。通过比对识别相关的序列，从而能获得目的基因和蛋白质的功能。

一、目的基因的筛选与获取3.获取目的基因的方法(1)人工合成在我国首批具有较高抗虫活性的转基因抗虫棉的培育过程中，科学家采用的是人工合成的方法。DNA合成仪转基因抗虫棉①前提：基因比较小、核苷酸序列已知②方法：通过DNA合成仪用化学方法直接合成

一、目的基因的筛选与获取3.获取目的基因的方法①含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。②种类基因组文库：部分基因文库：含有一种生物所有基因的文库含有一种生物部分基因的文库（主要指：cDNA文库）(2)从基因文库中获取

一、目的基因的筛选与获取①基因组文库受体菌该受体菌群为基因组文库

一、目的基因的筛选与获取②cDNA文库如果用某种生物发育的某个时期的mRNA产生的多种互补DNA（也叫cD