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版本号：
MicroGelExtractionKit
微量琼脂糖凝胶回收试剂盒
目录号：CW0524
保存：室温
组分说明
Cat.No.CW0524
KitSize50
BufferPG50ml
BufferPS15ml
BufferPW（concentrate）10ml
BufferEB10ml
SpinColumnDS50
CollectionTube（2ml）50
产品简介
本试剂盒于从普通或低琼脂糖凝胶中回收纯化微量片段，溶胶速度快，并利用硅基质膜技术，以非常小
的终洗脱体积（可少至10μl），从琼脂糖凝胶中，快速纯化50bp-50kb的片段，纯化过程有效去除引物、寡核苷
酸、酶等杂质，从而可获得高纯度、高浓度，完整性好的，回收率高达90%。本试剂盒回收纯化的可直接用于
、连接和转化、酶切、标记、体外转录等分子生物学实验。
注意事项
1.第一次使用前应按照试剂瓶的说明在BufferPW中加入无水乙醇。
2.使用前请检查BufferPG是否出现结晶或者沉淀，结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
3.电泳时使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
4.切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对造成损伤。
5.回收率与初始量和洗脱体积有关。
6.所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
自备：无水乙醇，异丙醇，离心管
操作步骤
1.将单一的目的条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分），放入干净的离心管（自备）中，称取重量。
注意：若胶块的体积过大，可将胶块切成碎块。
2.向胶块中加入3倍体积BufferPG；当琼脂糖凝胶浓度2%时，建议使用6倍体积BufferPG（如凝胶重为100mg，其
体积可视为100μl，依此类推）。
3.50℃孵育10分钟，其间不断温和地上下颠倒离心管，以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块，可再补加一些Buffer
PG或继续放置几分钟，直至胶块完全溶解。
注意：在胶充分溶解后检测pH值，若pH值大于7.5，可向含有的胶溶液中加10-30μl的3M醋酸钠（pH5.0）将pH值调到5-7。
4.加入1倍胶体积异丙醇，上下颠倒混匀（如凝胶为100mg,则加入100μl异丙醇）。
5.柱平衡：向已装入收集管（CollectionTube）中的吸附柱（SpinColumnDS）中加入200μlBufferPS，12,000rpm
（~13,400×g）离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6.将步骤4中所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温放置2分钟，12,000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，
将吸附柱放回收集管中。
注意：吸附柱容积为700μl，若样品体积大于700μl可分批加入。
7.吸附柱中加入500μlBufferPG，12,000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
8.向吸附柱中加入650μlBufferPW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm离心1分钟，倒掉收集管中
的废液，将
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