WO2025140356A1 一种寡核苷酸集合以及多重扩增子建库方法 （南京诺唯赞生物科技股份有限公司）.docxVIP

(12)按照专利合作条约所公布的国际申请

(19)世界知识产权组织国际局

(43)国际公布日

2025年7月3日(03.07.2025)

WIPOIPCT

(10)国际公布号

WO2025/140356A1

(51)国际专利分类号：

C12Q1/6876(2018.01)C12Q1/6869(2018.01)

C40B50/06(2006.01)

(21)国际申请号：PCT/CN2024/142540

(22)国际申请日：2024年12月26日(26.12.2024)

(25)申请语言：中文

(26)公布语言：中文

(30)优先权：

202311825749.52023年12月28日(28.12.2023)CN

(71)申请人：南京诺唯赞生物科技股份有限公司(NANJINGVAZYMEBIOTECHCO.,LTD.)[CN/CN];中国江苏省南京市栖霞区红枫科技园C1-2栋210046(CN)。

(72)发明人：郭佳银(GUO,Jiayin);中国江苏省南京市栖霞区红枫科技园C1-2栋210046(CN)。李琪(LI,Qi);中国江苏省南京市栖霞区红枫科技园C1-2栋210046(CN)。王慧琪(WANG,Huiqi);中国江

苏省南京市栖霞区红枫科技园C1-2栋210046(CN)。易文洋(YI,Wenyang);中国江苏省南京市栖霞区红枫科技园C1-2栋210046(CN)。

(81)指定国(除另有指明，要求每一种可提供的国家保护):AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CV,CZ,DE,DJ,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,

GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IQ,

IR,IS,IT,JM,JO,JP,KE,KG,KH,KN,KP,KR,KW,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,MG,MK,MN,

MU,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,

SE,SG,SK,SL,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT,TZ,UA,UG,US,UZ,VC,VN,WS,ZA,ZM,ZW。

(84)指定国(除另有指明，要求每一种可提供的地区保护):ARIPO(BW,CV,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SC,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),欧亚(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),欧洲(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,

HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,ME,MK,MT,NL,NO,

(54)Title:OLIGONUCLEOTIDESETANDMULTIPLEXEDAMPLICONLIBRARYCONSTRUCTIONMETHOD

(54)发明名称：一种寡核苷酸集合以及多重扩增子建库方法

AA一管式一步法扩增通过T4连接酶的方式将Index引物和T4-panel物进行连接形成长弓物；然后进行多重扩增一步完成多重扩增子文库构建，BB

AA

一管式一步法扩增

%3srun?3335wu5.

%3srun?33

3

5wu

5.共P5.

5.8

第三寡核苷酸引物EE(T4-Panel物)FF

桥式引物SplintoligoGG

5p5端磷酸修饰HH

◆C3Spacer

55.388~

5

5.388~

Index-T4-panel长引物Ⅱ

T4DNA连接酶J

DNA聚合酶KK

1.Index引物和Pane污物通过桥式弓物和T4DNA连接酶生成index-T4-panel长引物；LL

2.多重扩增MM

WO2025/140356A1图3

WO2025/140356A1

AAOne-step,single-tubeamplification

BB