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阔鳞鳞毛蕨：组织培养技术解析与耐荫性探究

一、引言

1.1研究背景与意义

蕨类植物（Pteridophyta）作为植物界中具有维管束的孢子植物，在植物演化进程里占据着关键位置，是连接苔藓植物与种子植物的重要纽带。其历史可追溯至4亿多年前的中志留世，历经漫长岁月，在地球上构建起独特的生态位。全世界蕨类植物约有11916种，它们形态各异，生态习性丰富多样，广泛分布于全球，以热带和亚热带地区最为繁茂，在中国，蕨类植物约有38科177属2215种228个种下分类群，展现出东南多、西北少的分布格局，华南、西南地区尤为丰富，成为许多温带属的分布中心。

蕨类植物不仅是森林植被中草本层的重要组成部分，在生态系统中承担着不可或缺的角色，还具备颇高的经济价值。在观赏领域，其以优雅的线条、独特的叶形以及四季常绿的特性，赢得“无花之美”的赞誉，深受人们喜爱，如铁线蕨、肾蕨、凤尾蕨等，常被用于室内装饰与园林景观布置，为环境增添自然之美；在药用方面，部分蕨类植物含有特殊化学成分，具有药用功效，像卷柏、石韦等，在传统医学中应用广泛；在工业领域，石松、乌蕨等可作为原料，用于提取石松油和颜料等，为工业生产提供支持；此外，鳞毛蕨、复叶耳蕨等还可作为环境指示植物，反映生态环境的变化。

然而，由于人类活动的加剧，如森林砍伐、土地开垦、城市化进程加快等，蕨类植物的生存环境遭到严重破坏。同时，全球气候变暖引发的气候变化，如温度升高、降水模式改变等，也对蕨类植物的生长和繁衍产生负面影响，导致许多蕨类植物面临生存威胁，百余种蕨类植物已被列为珍稀濒危物种，如西藏石杉、七指蕨、天星蕨、滇南黑桫椤等。倘若这种状况持续恶化，不仅会导致生物多样性的丧失，还可能对整个生态系统的平衡和稳定造成严重破坏。

阔鳞鳞毛蕨（Dryopterischampionii）作为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物，分布于山东、河南等全国大部分地区。其叶色鲜绿且富有光泽，独特的耳状小羽片使其在外观上别具一格，不仅耐旱喜光，还具备耐荫的特性，能适应多种复杂生境，是一种极具潜力的优良地被植物，在园林应用中可作为林下片植植物，与山石搭配，营造出自然和谐的景观效果。但目前对阔鳞鳞毛蕨的研究主要集中在盆栽引种试验，对其组织培养技术和耐荫性的研究相对匮乏。组织培养技术能够实现阔鳞鳞毛蕨的快速繁殖，对于保护这一物种以及满足市场对其日益增长的需求具有重要意义；而深入研究其耐荫性，则可以为其在园林中的合理配置提供科学依据，充分发挥其生态和观赏价值。

1.2研究目的

本研究旨在系统地探究阔鳞鳞毛蕨的组织培养技术和耐荫性。通过开展组织培养技术研究，优化各培养阶段的条件，包括孢子处理及萌发、原叶体增殖、愈伤组织诱导、丛生芽分化、生根以及炼苗移栽等，建立高效稳定的阔鳞鳞毛蕨组织培养技术体系，为其规模化生产和种质资源保存奠定坚实基础。同时，通过设置不同光照强度处理，研究遮荫对阔鳞鳞毛蕨形态指标（如株高、叶片数、叶面积等）、生理指标（如叶绿素含量、可溶性糖含量、丙二醛含量等）、光合指标（如光合速率、蒸腾速率、气孔导度等）以及叶绿素荧光参数的影响，明确其耐荫能力和适应机制，为其在园林景观中的科学应用提供全面的理论依据和技术支持。

1.3国内外研究现状

1.3.1蕨类植物组织培养技术研究进展

蕨类植物组织培养技术的研究始于20世纪50年代初，最初主要是作为研究植物形态发生和遗传变异的有效体系。经过多年发展，目前已取得了较为显著的成果，在蕨类植物的研究和生产中得到了广泛应用。

在基础培养基选择方面，多种培养基被应用于蕨类植物组织培养，常见的有MS、1/2MS、N6以及Miller、Nitsch、Prague等。不同蕨类植物对基础培养基的需求存在差异，欧紫萁孢子在低氨浓度的Knop、Knudson或者1/4MS培养基中生长最佳；分枝莎草蕨孢子在1/4MS培养基中萌发率最高；紫萁孢子在1/8MS培养基中萌发率可达95.3%，且萌发速度快；而巢蕨则以全量MS培养基效果最佳。

碳源对于蕨类植物组织培养也至关重要。一般来说，蔗糖是常用的碳源，其浓度对培养效果有显著影响。在阔鳞鳞毛蕨组织培养中，不同阶段对蔗糖浓度的需求可能不同，合适的蔗糖浓度能够为培养物提供充足的能量，促进其生长和发育。

孢子消毒方式直接关系到组织培养的污染率。通常先将采集的成熟孢子干燥1-2d，然后在70%酒精中消毒几秒，再转入升汞溶液或者次氯酸钠中消毒2min左右，最后用无菌水漂洗几次。为增强消毒效果，还可使用表面活性剂如吐温。对于具有休眠特性的孢子，如桫椤、狼尾蕨、鹿角蕨的孢子，可用GA3预处理2-5min打破休眠。

光照对蕨类植物组织培养的影响涉及光照强度、光照时间和光质等多个方面。