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正交试验法优化淫黄颗粒的提取工艺

【摘要】［目的］优化淫黄颗粒的提取工艺。［方法］采用正交试验法，以提取液中淫羊藿苷的含量为考察指标，对影响水煎提取效果的加水量、浸泡时间、煎煮时间、次数等4个因素进行研究。［结果］淫黄颗粒的最佳提取工艺为A2B2C3，即加水量为8倍，提取3次，每次。［结论］该实验所优选的工艺稳定，可行。

【关键词】淫黄颗粒总黄酮淫羊藿苷提取工艺正交试验

Abstract:［Objective］OptimisetheextracttechnicalofYinhuangGranules.［Method］Takeorthogonaltest,takecarriincontentinextractasobservationindex,studythe4factorsofwateramount,sippingtime,decoctingtimeandtimesinfluencingthedecoctionextractresult.［Result］ThebestextracttechnicalisA2B2C3,8timesforwater,3timesofextract,/time.［Conclusion］Theexperimentshowsthetechnicalisstableandavailable.

Keywords:YinhuangGranules；totalflavones；icariin；extracttechnical；orthogonaltest

淫黄颗粒系以淫羊藿为君，配伍黄芪而制成的中药复方制剂，具有补气健肾之功效，主要用于肾病综合征的治疗。为确保该制剂的临床疗效，本文采用正交设计方法，以干膏收率和总黄酮提取率为指标，对淫黄颗粒水提取工艺进行优化研究。

1仪器与材料

TU1800PC型紫外可见分光光度计。淫羊藿苷对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：110737200312。药材购于杭州康佳医药有限公司，经鉴定符合《中国药典》2005版(二部)［1］规定。

2方法与结果

正交试验设计

选用L9(34)正交表，以干膏收率和总黄酮提取率为考核指标，考察水提取中的加水量、煎煮时间和煎煮次数三个因素，每个因素设三水平。其因素水平见表1。表1正交试验因素水平表

样品提取液的制备

按处方配比称取药材适量，按正交试验表进行水提取，药液经滤纸滤过，滤液浓缩至1∶2，备用。

干膏收率的测定

精密量取上述提取液50ml，浓缩至一定体积，移置于已干燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥至恒重，计算干浸膏收率。结果见表2。

总黄酮含量的测定

对照品溶液的制备

精密称取淫羊藿苷对照品，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。

测定波长的选择

精密量取上述对照品溶液，置10ml容量瓶中，加/L三氯化铝溶液，混匀，加甲醇稀释至刻度，摇匀，于70℃恒温水浴中加热10min，取出后室温放冷。用TU1800型紫外可见分光光度计，于400～700nm波长范围内扫描，于波长处有最大吸收，故选择为测定波长。

标准曲线的制备

精密量取对照品溶液0、、、、、、、，分别置10ml容量瓶中，各加/L三氯化铝溶液，混匀，加甲醇稀释至刻度，摇匀，于70℃恒温水浴中放置10min，取出后室温放冷，于的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，（得标准曲线：y=+(r=)。淫羊藿苷在～/ml浓度范围内呈良好的线性关系。

重现性试验

精密量取同一批提取液6份，按含量测定方法制备，并按标准曲线法测定吸收度，RSD=%，重现性良好。

加样回收率试验

取已知含量的提取液6份，加入不同量的淫羊藿苷对照品，按含量测定方法制备，并按标准曲线法测定吸收度，计算加样回收率，结果见表3。平均回收率为%，RSD=%表3回收率试验结果

含量测定

精密量取正交试验提取液1ml，置蒸发皿中，水浴上蒸干后，残渣加甲醇溶解，移入10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取样品溶液2ml，置10ml容量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加/L三氯化铝溶液”起依法测定吸收度，根据标准曲线计算黄酮含量和总黄酮提取总量，结果见表2。

表2正交试验设计及干膏收率和总黄酮提取率

5结果分析

正交试验结果进行方差分析，结果见表4和表5。以干浸膏得率为考察指标，表3～2中极差R值大小显示，各因素作用主次为C＞B＞A；方差分析结果表明：C因素的影响有极显着性差异，A因素和B因