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人工miRNA表达框构建测试试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.人工miRNA表达框构建常用的载体是（）

A.克隆载体B.表达载体C.穿梭载体D.噬菌体载体

2.构建人工miRNA表达框时，首先要确定（）

A.启动子B.目的miRNA序列C.终止子D.标记基因

3.用于人工miRNA表达框转录的酶是（）

A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆转录酶D.限制性内切酶

4.以下哪种碱基配对方式在miRNA设计中很关键（）

A.A-TB.G-CC.A-UD.G-U

5.人工miRNA表达框构建中，连接片段常用的酶是（）

A.蛋白酶B.连接酶C.淀粉酶D.脂肪酶

6.构建表达框时，选择合适启动子主要依据是（）

A.大小B.来源C.表达特性D.序列长度

7.检测人工miRNA表达框是否成功导入细胞的方法是（）

A.核酸电泳B.蛋白印迹C.荧光定量D.抗性筛选

8.人工miRNA通常作用于靶基因的（）

A.启动子区域B.编码区C.3’UTRD.内含子

9.构建人工miRNA表达框的基本步骤顺序是（）

A.设计-克隆-连接-转化B.克隆-设计-连接-转化

C.连接-设计-克隆-转化D.转化-设计-克隆-连接

10.构建过程中，防止目的片段自身环化的方法是（）

A.提高温度B.增加酶量C.双酶切D.降低反应时间

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.人工miRNA表达框构建涉及的元件有（）

A.启动子B.miRNA序列C.终止子D.增强子

2.设计人工miRNA序列时需要考虑（）

A.长度B.碱基组成C.二级结构D.与靶基因互补性

3.常用的构建人工miRNA表达框的技术有（）

A.PCR技术B.酶切连接技术C.基因编辑技术D.核酸杂交技术

4.以下哪些是构建人工miRNA表达框常用的工具酶（）

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.Taq酶D.碱性磷酸酶

5.人工miRNA表达框可以导入的细胞类型有（）

A.动物细胞B.植物细胞C.细菌细胞D.真菌细胞

6.构建成功的人工miRNA表达框应具备（）

A.能正常转录B.能准确加工C.能有效调控靶基因D.能自我复制

7.选择载体时需要考虑的因素有（）

A.载体大小B.多克隆位点C.复制原点D.抗性标记

8.在人工miRNA表达框构建中，质量控制包括（）

A.序列准确性检测B.表达水平检测C.活性检测D.稳定性检测

9.人工miRNA表达框构建可应用于（）

A.基因功能研究B.疾病治疗C.作物改良D.药物研发

10.优化人工miRNA表达框构建效率的方法有（）

A.优化反应条件B.选择合适引物C.提高载体浓度D.改进连接方法

三、判断题（每题2分，共10题）

1.人工miRNA表达框构建不需要考虑启动子方向。（）

2.构建过程中使用的限制性内切酶切割位点越多越好。（）

3.人工miRNA只能调控内源基因。（）

4.载体的选择对人工miRNA表达框构建影响不大。（）

5.设计人工miRNA序列时，长度越短越好。（）

6.构建好的人工miRNA表达框可直接在生物体内发挥作用。（）

7.核酸电泳可用于检测人工miRNA表达框是否构建成功。（）

8.人工miRNA表达框构建必须依赖DNA连接酶。（）

9.多个miRNA序列可以整合到一个表达框中。（）

10.构建人工miRNA表达框时，对反应体系的温度没有要求。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述人工miRNA表达框构建的基本原理。

通过将人工设计的miRNA序列与启动子、终止子等元件组装到合适载体中，导入细胞后，在启动子驱动下转录出miRNA前体，经加工形成成熟miRNA，与靶基因互补配对调控其表达。

2.人工miRNA表达框构建中选择载体的要点是什么？

要点包括载体大小合适便于操作，有合适多克隆位点用于插入目的片段，有可自主复制的复制原点，具备筛选所需