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流式细胞术应用试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.流式细胞术直接测量细胞参数的主要物理基础是？

A.细胞的颜色

B.细胞的形状

C.细胞对激光的散射特性及荧光强度

D.细胞的导电性

2.在流式细胞术荧光标记中，若需检测活细胞表面CD4抗原，同时检测细胞内细胞因子IL-2，下列荧光标记组合最合适的是？

A.PE-Cy7标记CD4，FITC标记IL-2

B.APC标记CD4，PE标记IL-2

C.PerCP-Cy5.5标记CD4，PE标记IL-2

D.FITC标记CD4，APC标记IL-2

3.衡量细胞颗粒大小和内部复杂性的参数是？

A.FSC（前向散射）

B.SSC（侧向散射）

C.FL1（荧光通道1）

D.FSC/SSC散点图

4.下列哪种方法常用于检测细胞周期的G1期阻滞？

A.检测细胞内周期蛋白（如CyclinD1）

B.检测细胞凋亡相关蛋白（如Caspase3）

C.检测线粒体膜电位

D.检测核DNA含量

5.流式细胞术上进行细胞凋亡检测时，常用的膜通透性指示剂是？

A.7-AAD（异硫氰酸荧光素标记的七氨杂酞菁）

B.AnnexinV-FITC

C.PI（碘化丙啶）

D.Hoescht33342

6.用于流式细胞术进行细胞表面标记的抗体主要是哪种类型？

A.IgG抗体

B.IgM抗体

C.胶体金标记抗体

D.直接结合细胞表面受体的单克隆抗体

7.流式细胞术数据分析中，用于评估样本异质性的参数是？

A.平均荧光强度（MFI）

B.峰值高度

C.CV（变异系数）

D.活细胞百分比

8.在进行多色流式细胞术时，为减少荧光串色，应优先选择的荧光染料组合是？

A.FITC和PE

B.APC和PE

C.APC和PerCP-Cy5.5

D.PE-Cy7和Cy7

9.下列哪项技术属于流式细胞术的应用范畴？

A.蛋白质质谱分析

B.基因测序

C.细胞分选

D.微流控芯片制备

10.用于流式细胞术检测细胞内DNA含量，通常需要将细胞固定并进行？

A.荧光激活细胞分选（FACS）

B.碘化丙啶（PI）染色

C.RNA干扰

D.蛋白质印迹

二、判断题（每题1分，共10分，请判断下列说法正误，正确的划“√”，错误的划“×”）

1.流式细胞术可以同时分析单个细胞多个参数，但不能进行细胞分选。（）

2.FSC参数越高，代表细胞体积越大或内部颗粒越复杂。（）

3.使用流式细胞术检测细胞凋亡时，AnnexinV-FITC染色阳性、PI染色阴性细胞代表早期凋亡。（）

4.多色流式细胞术实验中，抗体浓度越高，检测灵敏度越高，背景荧光也一定越高。（）

5.细胞因子检测可以通过直接检测细胞因子mRNA表达来实现。（）

6.流式细胞术分析细胞周期时，G0/G1期细胞通常具有最高的DNA含量。（）

7.任何荧光染料或荧光标记抗体都可以在流式细胞仪上使用。（）

8.在进行流式实验前，细胞样品必须经过充分的洗涤以去除游离荧光染料。（）

9.流式细胞术数据分析中，可以使用散点图、直方图等多种方式展示数据。（）

10.高通量流式细胞术（High-ThroughputFlowCytometry）可以一次性分析数以万计的细胞。（）

三、简答题（每题5分，共20分）

1.简述流式细胞术进行细胞表面标志物检测的基本步骤。

2.简述流式细胞术检测细胞凋亡的两种不同方法及其基本原理。

3.简述FSC和SSC参数在流式细胞术分析中的基本含义及其应用。

4.简述流式细胞术数据分析中，设置阴性对照（如IgG对照）的目的。

四、论述题（10分）

设计一个流式细胞术实验方案，用于研究一种新的小分子化合物对JurkatT细胞增殖和细胞凋亡的影响。请说明实验目的、需要检测的细胞表型/细胞内分子、具体的实验分组、所需的荧光标记抗体或染料、以及简要的实验流程和数据分析思路。

试卷答案

一、单项选择题

1.C

解析：流式细胞术利用激光照射细胞，通过检测细胞散射光信号（FSC和SSC）和发射的荧光信号来获取细胞信息，核心物理基础是散射和荧光。

2.A