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研究报告

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一例山羊轮状病毒和大肠杆菌混合感染的诊治和分析

一、病例概述

1.1.病例来源

(1)本病例来源于我国某养殖场，该养殖场主要从事山羊养殖，养殖规模较大，存栏量约为500头。近期，养殖场内部分山羊出现腹泻、脱水等症状，且病情逐渐蔓延，对养殖场的经济效益造成了严重影响。

(2)通过对病例发生前后的饲养管理情况进行调查，发现养殖场在饲养过程中存在一些问题，如饲料质量不达标、饲养环境不卫生、缺乏定期消毒等。此外，养殖场内的山羊密度较大，通风不良，容易导致病原菌滋生和传播。

(3)病例来源可能与养殖场周边环境有关。该养殖场位于城乡结合部，周边存在多家养殖场，且附近有较多的屠宰场和肉类加工厂。这些场所的废弃物处理不当，可能成为病原菌的传播途径，导致山羊感染轮状病毒和大肠杆菌混合感染。

2.2.发病情况

(1)发病初期，养殖场内共有10头山羊出现症状，随后病例迅速增加，短短一周内，感染山羊数量达到30头。发病山羊主要表现为腹泻，粪便呈水样，带有黏液和血丝，伴有明显的食欲减退和体重下降。病羊精神萎靡，采食量减少，饮水量增加，部分病羊出现脱水症状。

(2)随着病情的加剧，部分病羊出现呼吸困难，呼吸急促，伴有咳嗽。部分病羊体温升高，最高可达42℃，体温持续不降。病羊的蹄部出现红肿，行走困难，有的病羊甚至无法站立。在发病高峰期，养殖场内每天都有新的病例出现，病情发展迅速。

(3)由于发病初期养殖场未能及时采取有效的防控措施，导致疫情进一步扩散。感染山羊的数量不断增加，病情逐渐恶化。在发病过程中，养殖场内其他健康山羊也出现了不同程度的应激反应，表现为精神沉郁、食欲下降等。此次疫情给养殖场带来了巨大的经济损失，同时也对周边环境造成了污染。为了控制疫情，养殖场不得不采取隔离措施，限制人员进出，加强消毒工作，并积极寻求兽医部门的帮助。

3.3.临床症状

(1)临床症状表现为病羊出现急性腹泻，粪便呈水样，颜色为黄色或绿色，带有明显的恶臭。部分病羊腹泻严重，粪便中混有血液和黏液，导致病羊出现脱水症状。脱水表现为皮肤弹性下降，口腔干燥，眼窝凹陷，体重迅速下降。

(2)感染山羊普遍食欲不振，采食量显著减少，饮水量增加。病羊精神状态不佳，表现为嗜睡、活动量减少，对外界刺激反应迟钝。部分病羊伴有呕吐，呕吐物含有未消化的饲料和黏液。

(3)在疾病进展过程中，病羊可能出现体温升高，体温可达40℃以上。部分病羊出现呼吸困难，呼吸急促，伴有咳嗽。同时，病羊的蹄部可能出现红肿，行走困难，严重时无法站立。这些临床症状表明病羊的体质状况严重受损，对病原体的抵抗能力下降。

二、病原学分析

1.1.轮状病毒检测

(1)在本次山羊轮状病毒检测中，我们采集了30头感染山羊的粪便样本，并采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术进行病毒检测。实验结果显示，其中25头山羊粪便样本中检测出轮状病毒核酸，阳性率为83.33%。根据病毒载量分析，阳性样本中病毒拷贝数最高可达10^8拷贝/克粪便。

(2)通过对阳性样本进行基因测序，我们发现主要感染的是A组轮状病毒，占阳性样本的80%。此外，还有20%的样本检测出B组轮状病毒。在病毒基因序列比对中，我们发现在阳性样本中存在多个与已知轮状病毒株高度同源的序列，同源性达到98%以上。

(3)在病例分析中，我们发现，感染轮状病毒的山羊普遍表现为腹泻、脱水等症状。通过对阳性样本进行流行病学调查，发现这些山羊在发病前一个月内，曾接触过来自周边养殖场的山羊。结合实验室检测结果，推测本次山羊轮状病毒感染可能与养殖场周边环境中的病毒传播有关。在后续的防控措施中，我们建议加强养殖场的生物安全防护，定期对养殖场环境进行消毒，以降低病毒传播风险。

2.2.大肠杆菌检测

(1)本次大肠杆菌检测针对30头感染山羊的粪便样本进行了分离培养和生化鉴定。实验过程中，我们采用了MacConkey琼脂和伊红美蓝琼脂平板，以及一系列生化试剂对分离出的疑似大肠杆菌进行鉴定。结果显示，共分离出15株大肠杆菌，检出率为50%。这些菌株对大肠杆菌O157:H7、O78:H4和O138:H9等常见血清型进行了分型鉴定。

(2)通过PCR技术对分离的大肠杆菌菌株进行了毒素基因检测，发现其中10株携带了肠毒素基因，阳性率为66.67%。进一步检测发现，这些携带肠毒素基因的菌株对乳糖酶、甘露醇酶等生化指标表现出不同的反应，表明大肠杆菌的毒力存在多样性。

(3)结合临床病例，我们发现大肠杆菌感染的山羊主要表现为腹泻、脱水等症状，且病情严重时可能出现血便。在流行病学调查中，我们发现这些感染山羊在发病前一个月内，曾接触过来自周边养殖场的大肠杆菌污染源。因此，我们建议养殖场加强饲料和饮水管理，严格控制病原菌的传播。同时，