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研究报告

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一例鸡新城疫与球虫病混合感染的诊治

一、病例概述

1.病例背景

(1)某养殖场位于我国南方地区，饲养规模达到10000只鸡，品种为肉鸡。该养殖场采用全进全出的饲养模式，实行严格的生物安全措施。然而，近期该养殖场出现了一种突发性疾病，症状表现为鸡群食欲下降、精神萎靡、呼吸困难、腹泻等。经过初步调查，该养殖场在短短一周内已有500只鸡出现症状，死亡率达到5%。

(2)结合养殖场的历史资料和兽医现场调查，初步判断该疾病可能与新城疫和球虫病有关。新城疫是一种高度传染性疾病，对鸡群健康危害极大，可导致鸡只死亡或生长缓慢。球虫病则是鸡常见的一种寄生虫病，可引起鸡只消化不良、体重下降、免疫力降低等症状。这两种疾病在鸡群中同时发生，可能导致病情加重，增加死亡率。

(3)为了进一步了解疾病的流行情况和病因，养殖场对发病鸡只进行了详细的临床观察和病理剖检。病理剖检结果显示，发病鸡只的呼吸道和消化道黏膜出现明显炎症，肝脏、脾脏肿大，肾脏出血。同时，通过实验室检测，从发病鸡只的肠道组织中分离出球虫卵囊，从气管和肺组织中分离出新城疫病毒。这些检测结果进一步证实了该养殖场鸡群感染了新城疫和球虫病。

2.临床症状

(1)发病初期，鸡群表现出明显的食欲减退，采食量较正常时期下降约30%。病鸡精神萎靡，常缩颈、垂头，不愿活动。据观察，病鸡群中有约20%的鸡只出现呼吸道症状，如咳嗽、喷嚏、呼吸急促，个别鸡只伴有啰音。同时，病鸡粪便呈水样，颜色变浅，带有黏液和血液，一天内粪便量增加约50%。

(2)随着病情的发展，病鸡的临床症状逐渐加重。大约在发病后的第3天，鸡群中有约30%的鸡只出现瘫痪症状，无法站立。部分病鸡表现出神经症状，如头颈震颤、角弓反张等。根据统计，此时鸡群的死亡率达到10%。此外，发病鸡只的体重下降明显，与同期健康鸡只相比，体重减轻约10%。

(3)在发病的第5天，病鸡的临床症状达到高峰。约60%的鸡只出现腹泻，粪便中带有黏液和血液，严重者粪便呈鲜红色。鸡群中有约40%的鸡只出现呼吸道症状加重，表现为呼吸困难、张口呼吸、喘鸣等。此外，部分病鸡出现结膜炎，眼角有黏液分泌物，影响视力。在此期间，鸡群的死亡率继续上升，达到20%。

3.病理变化

(1)在病理剖检过程中，观察到病鸡的呼吸道黏膜呈现急性炎症反应，气管和支气管内充满黏液和纤维蛋白性渗出物，部分区域可见黄色干酪样物。肺部出现出血点和瘀斑，肺实质水肿。此外，气囊增厚，内有白色干酪样渗出物。

(2)消化道黏膜出现明显炎症，尤其是肠道，表现为肠壁增厚、浆膜出血，尤其在回盲口处。肠腔内容物呈水样，含有大量黏液和血液。肝脏出现肿大，呈土黄色，质地较硬，表面有白色条纹。脾脏肿大明显，呈暗红色。

(3)在肾脏方面，出现出血点和瘀斑，肾小球和肾小管上皮细胞肿胀，肾小管内有蛋白质沉积。此外，心脏出现心肌纤维变性，心包腔内有积液。其他器官如腺胃、肌胃、卵巢等均出现不同程度的炎症变化。这些病理变化表明病鸡内脏器官受损严重，功能受损。

二、病原学诊断

1.新城疫病毒检测

(1)新城疫病毒的检测采用实时荧光定量PCR技术，选取发病鸡的气管、肺和肝脏组织作为检测样本。实验结果显示，所有样本均呈现出新城疫病毒的阳性反应。其中，气管样本的CT值平均为21.5，肺样本为22.8，肝脏样本为20.9，表明病毒载量较高。

(2)为了验证PCR检测结果的准确性，我们进行了病毒分离实验。将检测阳性的气管和肺组织样本接种于鸡胚成纤维细胞中，经过72小时的培养，成功分离出新城疫病毒。病毒分离实验进一步证实了PCR检测结果的可靠性。

(3)通过病毒基因测序，我们得到了分离出的新城疫病毒全基因序列，并与已知的新城疫病毒基因序列进行比对。结果显示，分离出的病毒株与我国流行的新城疫病毒H5亚型高度同源，同源性达到98.7%。这表明本次疫情是由H5亚型新城疫病毒引起的。

2.球虫病病原检测

(1)在对球虫病病原进行检测时，我们采集了发病鸡的肠道组织样本，包括盲肠和结肠。样本经过固定、脱水、透明和包埋处理后，制作成石蜡切片。通过显微镜观察，发现盲肠黏膜上有大量球虫卵囊，形态规则，颜色呈棕褐色。根据卵囊的大小和形状，初步判断为巨型艾美球虫。

(2)为了进一步确定球虫病的病原种类，我们对采集到的肠道组织样本进行了球虫卵囊的DNA提取。提取的DNA经过PCR扩增，得到了球虫的特异性基因片段。通过比对已知的球虫基因序列，最终确认了病原为巨型艾美球虫，其基因序列同源性达到99%。

(3)在实验室条件下，我们将分离出的巨型艾美球虫卵囊接种于鸡胚成纤维细胞中，观察其发育过程。经过72小时的培养，卵囊成功孵化出子孢子，进一步证实了病原为巨型艾美球虫。同时，我们还对孵化出的子孢子进行了形