湖羊Lrh-1和LHR基因的研究.docxVIP

湖羊Lrh-1和LHR基因的研究

一、引言

湖羊作为我国特有的多胎绵羊品种，具有繁殖力高、早期生长发育快等优良特性，在肉羊产业中占据重要地位。繁殖性能是湖羊养殖效益的关键指标，而基因在调控动物繁殖过程中发挥着核心作用。肝受体类似物-1（Liverreceptorhomolog-1，Lrh-1）和促黄体素受体（Luteinizinghormonereceptor，LHR）基因是影响湖羊繁殖性能众多基因中的重要成员。深入研究这两个基因的结构、功能及其在湖羊繁殖调控中的作用机制，对于揭示湖羊高繁殖力的分子遗传基础，进而通过分子育种技术提高湖羊繁殖性能具有重要的理论和实践意义。

二、湖羊Lrh-1基因研究

（一）Lrh-1基因结构特征

cDNA序列：研究表明，湖羊Lrh-1基因cDNA序列全长1488bp。通过与其他物种的核酸序列比对发现，湖羊Lrh-1基因与牛的核酸序列相似度最高，达到98%。这显示了在进化过程中该基因在不同物种间具有较高的保守性，暗示其在维持生物基本生理功能方面可能发挥着关键且相似的作用。

编码氨基酸序列：湖羊Lrh-1基因编码区共编码495个氨基酸。其氨基酸序列与牛、人、马、猴、犬、小鼠、褐鼠等物种的氨基酸同源性分别为98%、97%、96%、97%、97%、86%和86%。从氨基酸同源性的差异可以看出，随着物种进化分支的不同，Lrh-1基因在一定程度上发生了适应性的变异，以满足不同物种在特定生态环境和生理需求下的功能要求，但同时也保留了相当比例的保守序列，以维持其核心的生物学功能。

（二）Lrh-1基因的组织表达谱

广泛表达且具组织特异性：Lrh-1mRNA在湖羊脑、消化及生殖系统等多种组织中均有表达，但表达量存在显著差异。在下丘脑组织中，Lrh-1mRNA的表达量相对最高。下丘脑作为神经内分泌调节的关键部位，参与调控动物的生殖、代谢等多种生理过程。Lrh-1在下丘脑中的高表达提示其可能通过下丘脑-垂体-性腺（HPG）轴，对湖羊的生殖内分泌活动产生重要影响。

消化系统中的表达：在湖羊的消化系统中，如皱胃、肝脏、小肠及大肠组织中也检测到Lrh-1免疫阳性细胞。尤其是在具有分泌功能的皱胃胃腺细胞、肝脏细胞、小肠和大肠肠腺细胞中有大量分布。这表明Lrh-1不仅参与湖羊的生殖调控，还在胃肠消化系统各组织的分泌功能中发挥重要作用，可能参与调节消化液分泌、营养物质代谢等过程，维持消化系统的正常生理功能，为动物整体的生长发育和繁殖活动提供物质基础和能量支持。

（三）Lrh-1基因在发情周期中的表达变化

HPG轴组织中的表达规律：在湖羊发情周期的不同阶段，下丘脑、垂体和卵巢间质组织中均检测到Lrh-1基因mRNA的表达。其中，在发情后期下丘脑和卵巢间质组织中Lrh-1mRNA相对表达量显著高于其他阶段（P＜0.05），而垂体组织中Lrh-1mRNA相对表达量在发情周期不同阶段间差异不显著（P＞0.05）。进一步研究发现，LRH-1免疫阳性颗粒在下丘脑和垂体组织的分泌细胞、卵巢卵泡颗粒细胞、输卵管黏膜上皮分泌细胞和子宫腺细胞中均有分布。并且，随湖羊发情周期的变化，下丘脑、垂体、卵巢、输卵管和子宫组织中LRH-1蛋白表达量差异显著，除下丘脑组织在发情期与间情期间存在显著差异（P＜0.05）外，其他组织在各阶段间均存在极显著差异（P＜0.01）。发情后期，下丘脑和卵巢组织中LRH-1蛋白表达量相对最高；间情期，输卵管组织中表达量相对最高；发情前期，垂体和子宫组织中表达量相对最高。这些结果表明Lrh-1基因参与发情周期湖羊下丘脑、垂体和卵巢功能的行使，其表达量变化与湖羊发情周期密切相关，可能通过调节相关激素的分泌和作用，参与卵泡发育、排卵等生殖过程的调控。

与生殖激素分泌的关联：通过对湖羊发情周期中Lrh-1表达模式的分析，发现其表达与促性腺激素的分泌存在一定关联。例如，在垂体中，Lrh-1的表达在发情周期的4个阶段存在显著差异，且在发情期表达量最高，与促卵泡生成素（FSH）浓度显著相关。这暗示Lrh-1可能通过影响垂体中促性腺激素的合成和分泌，间接调节卵巢中卵泡的发育和排卵过程，从而在湖羊的生殖调控中发挥重要作用。

三、湖羊LHR基因研究

（一）LHR基因外显子11多态性

多态性位点检测：采用聚合酶链式反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析方法对湖羊LHR基因外显子11核酸序列进行检测，发现6对引物扩增产物中，引物P2和P6的扩