耐有机溶剂脂肪酶的筛选、特性解析及在手性仲醇拆分中的应用研究.docxVIP

耐有机溶剂脂肪酶的筛选、特性解析及在手性仲醇拆分中的应用研究

一、引言

1.1研究背景

手性化合物研究已成为当今化学领域的关键部分，其在药物、材料、食品等行业中具有重要应用价值。手性仲醇作为一种重要的手性化合物，在不对称合成领域发挥着关键作用，是制备手性药物、农药、香料及其他功能性材料的重要中间体。例如，(S)-2-辛醇是高性能液晶和液晶器件不可或缺的手性原料，其旋光性和高介电常数与液晶的性能紧密相关，能显著提升液晶质量；(R)-2-辛醇则是合成类固醇、维生素E、昆虫性外激素等光学活性药物和农药的重要手性中间体。又如，(S)-2-戊醇是合成治疗老年痴呆症药物的关键原料，(S)-6-甲基-5-庚烯-2-戊醇是合成昆虫激素的重要原料，(S)-2-甲基-1-戊醇和(R)-2-甲基-1-戊醇都是合成棉花害虫信息激素的重要原料。

随着手性化合物市场需求的迅速增长，手性仲醇的制备技术受到了广泛关注。目前，手性仲醇的制备方法主要包括化学合成法和生物催化法。化学合成法通常需要使用昂贵的手性催化剂和苛刻的反应条件，且存在环境污染等问题；而生物催化法，特别是利用脂肪酶催化的不对称酶促反应，具有反应条件温和、选择性高、环境友好等优点，成为手性仲醇拆分的研究热点。

脂肪酶（Lipase，EC3.1.1.3），也被称为三酰基甘油水解酶，能够在油水界面催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应。微生物脂肪酶作为工业用脂肪酶的重要来源，不仅在理论研究中意义重大，在实际应用中也展现出巨大潜力。在非水相介质中，脂肪酶能够催化手性仲醇与酰基供体发生酯化或转酯化反应，从而实现手性仲醇的拆分。然而，传统脂肪酶在有机溶剂中的稳定性和活性较低，限制了其在非水相催化反应中的应用。

耐有机溶剂脂肪酶是一类特殊的脂肪酶，能够在高浓度有机溶剂中保持较高的稳定性和催化活性。这类脂肪酶的发现和研究，为手性仲醇的拆分提供了新的解决方案。耐有机溶剂脂肪酶在有机溶剂中能够更好地溶解底物和产物，提高反应速率和产率；还能减少副反应的发生，提高对映选择性。因此，筛选和研究耐有机溶剂脂肪酶，对于推动手性仲醇拆分技术的发展，实现手性化合物的绿色、高效合成具有重要的现实意义。

1.2耐有机溶剂脂肪酶的研究现状

耐有机溶剂脂肪酶的研究在近年来取得了显著进展，涵盖筛选方法、酶学性质和应用等多个关键领域。在筛选方法上，传统的基于自然条件的筛选方式，如从海洋自然环境中发现可耐受高浓度有机溶剂的微生物，虽能减少人为干预，但筛选周期长，且难以针对特定有机溶剂进行精确筛选。相比之下，基于代谢富集的筛选方法，通过在培养基中添加有机溶剂及表面活性剂，刺激细胞适应外界压力，能更有针对性地筛选出耐有机溶剂脂肪酶产生菌，周期也相对较短，不过使用化学药品可能影响细胞内部代谢过程。

在酶学性质方面，耐有机溶剂脂肪酶展现出独特优势。这类酶对有机溶剂具有高稳定性，在培养过程中，酶分子能够适应高浓度有机溶剂，从而在反应体系中保持稳定的催化性能。其适应性强，活性中心更加特化，能更好地应对有机溶剂带来的影响。酶活性高，在高浓度有机溶剂影响细胞膜及细胞内部物质溶解度的情况下，仍能保证细胞代谢正常进行。例如，从新疆酿酒葡萄内生菌中筛选得到的耐有机溶剂脂肪酶菌株M-CYI，经鉴定为Penicilliumas．tmienum，该菌遗传稳定性良好，多种有机溶剂对其产脂肪酶活具有促进作用，其中二甲苯作用最为明显，酶活为4.99U/mL，相对酶活达143.76％。

在应用领域，耐有机溶剂脂肪酶已广泛应用于生物化学及生物制药等多个行业。在生物催化制备手性化合物中，利用脂肪酶催化的不对称酶促反应拆分外消旋体，能够实现手性仲醇的高效制备。在油脂改性中，可通过催化酯交换反应改善油脂的性能；在含油废弃物的生物修复处理中，能有效分解油脂，减少环境污染。随着对高浓度有机溶剂需求的增加，耐有机溶剂脂肪酶的研究热度持续攀升，未来有望在更多领域实现突破和应用。

1.3手性仲醇拆分的研究现状

手性仲醇拆分在现代化学领域中占据着举足轻重的地位，其拆分方法丰富多样，主要包括化学拆分法、酶拆分法、不对称合成法、诱导结晶法、色谱拆分法和吸附法等。化学拆分法通过使用手性试剂与外消旋体反应，形成非对映异构体盐，再利用其物理性质差异进行分离，但该方法需要使用大量手性试剂，成本较高，且拆分效率有限。例如，在某些手性仲醇的拆分中，化学拆分法的产率仅能达到50%左右，且对映体过量值（ee值）难以达到较高水平。

酶拆分法，尤其是利用脂肪酶催化的不对称酶促反应，近年来备受关注。脂肪酶能够在温和的条件下，高效地催化手性仲醇的拆分，具有高立体选择性和区域选择