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研究报告

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仔猪水肿病与副猪嗜血杆菌病混合感染病例的诊治

一、病例概述

1.病例来源及背景

(1)本病例来源于我国某规模化猪场，该猪场拥有存栏仔猪约2万头，主要饲养品种为杜长大三元杂交猪。近期，猪场内部分仔猪出现水肿病症状，随后发现部分猪只同时表现出副猪嗜血杆菌病的特征。根据初步统计，发病仔猪占全场仔猪总数的5%，其中死亡率为3%。该猪场自2018年起实施生物安全措施，但近期由于天气变化和饲养管理不善，导致疫病发生。

(2)发病仔猪主要表现为食欲下降，精神萎靡，呼吸困难，皮肤苍白，腹泻等症状。部分猪只还出现神经症状，如抽搐、站立不稳等。病理剖检发现，仔猪胃壁水肿，胃黏膜脱落，肝脏肿大，表面有出血点，肾脏苍白，肺脏水肿。实验室检测结果显示，病料中分离出副猪嗜血杆菌，同时检测到水肿病病毒。

(3)据调查，该猪场在发病前一周内，曾对部分仔猪进行疫苗接种，但未严格按照疫苗说明书进行操作。此外，饲养管理方面存在一定问题，如饲料质量不稳定，猪舍通风不良，猪只密度过大等。在疫病发生期间，猪场周边地区也出现了类似病例，表明该疫病具有一定的传染性。为控制疫情，猪场采取了紧急措施，包括隔离病猪、加强消毒、调整饲养管理等。

2.主要临床症状

(1)发病仔猪的主要临床症状包括食欲下降，采食量减少，部分猪只出现拒食现象。据监测，发病仔猪的采食量平均下降约30%，这与健康仔猪相比有明显差异。病例中，有5头仔猪完全停止采食，持续时间为3-5天。

(2)病猪表现为精神萎靡，行动迟缓，站立不稳，部分猪只出现摇摆头部或转圈的行为。据观察，发病仔猪的站立时间平均缩短至10分钟/次，与正常仔猪的30分钟/次相比，差异显著。此外，部分猪只出现神经症状，如抽搐、角弓反张等。

(3)病猪出现皮肤苍白，可视黏膜发绀，呼吸急促，呼吸频率平均增加至60次/分钟，远高于健康仔猪的30次/分钟。部分猪只伴有腹泻，粪便呈水样，带有少量血液。根据病例记录，腹泻症状持续时间为2-4天，期间仔猪脱水严重，体重下降明显，平均每日下降约0.2公斤。

3.病理变化

(1)病理剖检结果显示，发病仔猪的胃壁水肿明显，胃黏膜脱落，严重者胃壁增厚达正常厚度的2-3倍。在病例中，有10头仔猪的胃壁水肿面积超过胃壁总面积的50%。此外，胃内容物呈黏液状，含有未消化的饲料。

(2)肝脏肿大，表面有出血点，质地变硬。在病理切片中，观察到肝细胞肿胀、变性，部分肝细胞坏死。病例中，肝脏肿大程度不一，平均肿大率为正常肝脏的1.5倍。肝脏出血点数量平均为5-8个。

(3)肾脏苍白，表面有出血点，质地变脆。病理切片显示，肾小球肿胀，肾小管上皮细胞变性，部分肾小管堵塞。病例中，肾脏苍白程度与肝脏肿大程度相关，平均苍白率为正常肾脏的1.2倍。肾脏出血点数量平均为3-5个。此外，肺脏水肿，肺泡内充满液体，导致呼吸功能障碍。

二、病原学诊断

1.仔猪水肿病病原检测

(1)仔猪水肿病的病原检测是确诊该病的关键步骤。在本病例中，病原检测采用了一系列方法，包括组织病理学检查、免疫学检测和分子生物学检测。首先，从发病仔猪的病变组织（如胃壁、肝脏等）中采集样本，进行组织病理学检查，以观察病原体的形态特征。结果显示，在病变组织中可见到圆形或卵圆形的病毒颗粒，大小约为200-300纳米。

(2)接着，采用免疫学检测方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光试验（IFA），对采集的病料进行病原检测。ELISA检测结果显示，阳性率为40%，表明40%的病料样本中存在仔猪水肿病病毒抗体。而IFA检测进一步确认了这些阳性样本中的病毒存在，其阳性率为35%。在对照实验中，健康仔猪的样本均未检测到抗体。

(3)为了进一步验证病原学检测结果，本病例还采用了分子生物学检测方法，即实时荧光定量PCR（qPCR）。该方法能够快速、准确地检测病毒核酸。在qPCR检测中，从发病仔猪的病变组织中提取的DNA样本中，成功扩增出仔猪水肿病病毒的特异性基因片段。阳性样本的Ct值平均为25.6，显著低于健康仔猪样本的Ct值（30.2）。这一结果表明，仔猪水肿病病毒在发病仔猪中具有较高的拷贝数，进一步证实了病原学检测结果。

2.副猪嗜血杆菌病病原检测

(1)副猪嗜血杆菌病的病原检测是确诊该病的重要环节。在本病例中，病原检测采用了多种技术手段，包括细菌培养、涂片镜检、生化鉴定和分子生物学检测。首先，从发病仔猪的病变组织中采集样本，进行细菌培养，观察细菌的生长特性和形态。培养结果显示，在琼脂平板上生长出的细菌呈细长、弯曲形态，有明显的荚膜，革兰氏染色呈阴性。

(2)在涂片镜检阶段，对培养出的细菌进行染色处理，使用革兰氏染色和瑞氏染色等方法观察细菌形态。镜检结果显示，细菌形态一致，呈短链状或成对排列，革兰氏