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2026年pcr性能验证考试最新试题及答案

考试时长：120分钟满分：100分

试卷名称：2026年PCR性能验证考试最新试题

考核对象：生物技术专业学生及行业从业者

题型分值分布

-判断题（总共10题，每题2分）总分20分

-单选题（总共10题，每题2分）总分20分

-多选题（总共10题，每题2分）总分20分

-案例分析（总共3题，每题6分）总分18分

-论述题（总共2题，每题11分）总分22分

总分：100分

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一、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR扩增效率越高，表明该反应体系对模板的扩增能力越强。

2.理想的PCR反应体系应包含Mg2?、dNTPs、引物和Taq酶。

3.引物二聚体形成会导致PCR扩增产物特异性降低。

4.退火温度越高，PCR扩增的特异性越强。

5.PCR产物凝胶电泳时，DNA条带越亮表明扩增效率越高。

6.无菌操作是PCR实验中防止污染的关键措施。

7.PCR扩增产物的大小可以通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。

8.限制性内切酶可用于PCR产物的酶切鉴定。

9.PCR循环数越多，扩增产物浓度越高。

10.SYBRGreenI染料可用于实时荧光定量PCR（qPCR）检测。

二、单选题（每题2分，共20分）

1.下列哪种物质是PCR反应的引物？

A.DNA聚合酶

B.dNTPs

C.退火温度

D.互补链

2.PCR扩增过程中，哪个阶段需要最高温度？

A.变性

B.退火

C.延伸

D.循环

3.以下哪种方法可用于提高PCR扩增的特异性？

A.降低退火温度

B.增加引物浓度

C.使用高浓度的Mg2?

D.延长延伸时间

4.PCR产物凝胶电泳时，出现多条非特异性条带可能的原因是？

A.引物设计不合理

B.变性温度过高

C.dNTPs浓度过低

D.DNA聚合酶活性过高

5.以下哪种试剂可用于PCR产物的纯化？

A.乙醇

B.氯仿

C.SDS

D.蛋白酶K

6.实时荧光定量PCR（qPCR）中，哪个指标用于评估扩增效率？

A.Ct值

B.R2值

C.ΔCt值

D.Cq值

7.PCR实验中，引物退火温度通常在哪个范围内？

A.30–40°C

B.50–65°C

C.70–85°C

D.90–100°C

8.以下哪种方法可用于检测PCR产物的大小？

A.荧光定量分析

B.限制性内切酶酶切

C.毛细管电泳

D.DNA测序

9.PCR实验中，Mg2?浓度过高可能导致？

A.扩增效率降低

B.非特异性扩增增加

C.引物二聚体形成减少

D.DNA聚合酶活性增强

10.以下哪种试剂可用于PCR反应的终止？

A.乙醇

B.氯仿

C.乙酸钠

D.异丙醇

三、多选题（每题2分，共20分）

1.PCR反应体系中，以下哪些成分是必需的？

A.DNA模板

B.DNA聚合酶

C.引物

D.dNTPs

E.甘油

2.以下哪些措施可减少PCR污染？

A.使用无酶水

B.实验区域定期消毒

C.引物设计避免非特异性结合

D.使用一次性移液器头

E.重复使用移液器枪

3.PCR产物凝胶电泳时，以下哪些现象表明扩增成功？

A.出现单一明亮条带

B.出现多条弥散条带

C.无条带出现

D.条带亮度均匀

E.条带拖尾

4.以下哪些因素会影响PCR扩增效率？

A.引物浓度

B.DNA模板质量

C.循环数

D.退火温度

E.pH值

5.实时荧光定量PCR（qPCR）中，以下哪些指标可用于评估扩增特异性？

A.R2值

B.Ct值

C.重复性

D.熔解曲线分析

E.电荷转移率

6.