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生化分离试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。下列每小题选项中，只有一项是最符合题目要求的。请将正确选项的字母填在题后的括号内。）

1.在生化分离过程中，利用分子大小差异进行分离的技术主要是：

A.离心

B.萃取

C.凝胶过滤层析

D.离子交换层析

2.下列关于离子交换树脂的叙述，错误的是：

A.其分离原理是基于分子间的电荷相互作用

B.强酸型树脂适用于分离带负电荷的蛋白质

C.树脂的离子交换容量是其重要性能指标

D.交换后的树脂必须用强酸或强碱进行再生

3.在亲和层析中，连接在载体上的通常是：

A.待纯化的蛋白质

B.抗体或配体

C.离子交换基团

D.凝胶过滤介质

4.高效液相色谱（HPLC）与经典柱色谱相比，其主要优势之一是：

A.分离效率较低

B.分析速度慢

C.可自动进行且分析速度快

D.仅适用于小分子物质的分离

5.适用于分离密度差异较大的物质的对流分离技术是：

A.超滤

B.透滤

C.离心

D.膜蒸馏

6.在萃取操作中，为了提高目标产物的萃取率，通常需要：

A.降低两相接触面积

B.选择分配系数较小的萃取剂

C.增大两相接触面积

D.使用亲和力弱的萃取剂

7.下列哪种方法不适合用于分离淀粉和葡萄糖？

A.离子交换层析

B.凝胶过滤层析

C.萃取

D.膜过滤

8.蛋白质结晶过程中，溶剂化合物的浓度通常需要：

A.低于其溶解度

B.高于其溶解度

C.等于其溶解度

D.为零

9.用于分离水溶液中不同分子量物质的最常用膜分离方法是：

A.反渗透

B.超滤

C.微滤

D.纳滤

10.影响层析分离效果的关键因素之一是：

A.层析柱的长度

B.层析剂的种类

C.层析液的流速

D.以上都是

二、填空题（每空1分，共15分。请将答案填写在横线上。）

1.生化分离的目的是将混合物中的______、______或______分离开来，并尽可能保持其生物活性。

2.离心分离是基于物质密度差异，利用离心力场使密度不同的物质实现______的过程。

3.凝胶过滤层析（分子排阻层析）是______按分子大小进行分离的技术，其分离介质是具有______的凝胶珠。

4.离子交换层析的分离过程主要包括______、______和______三个步骤。

5.亲和层析是利用生物分子间具有的高度______的特异性相互作用进行分离的技术。

6.在萃取过程中，目标物质在两相中的浓度比称为______，它决定了萃取的效率。

7.膜分离技术是利用具有特定______的膜，在外力驱动下实现物质分离的过程。

8.影响蛋白质结晶的因素主要有______、______和______等。

9.超滤和微滤都属于压力驱动型的膜分离过程，其中______能截留更小分子量的物质。

三、名词解释（每小题3分，共12分。请给出简洁、准确的定义。）

1.分配系数

2.传质阻力

3.等电点

4.截留分子量

四、简答题（每小题5分，共20分。请简要回答下列问题。）

1.简述离子交换层析与凝胶过滤层析在分离原理上的主要区别。

2.在进行蛋白质萃取时，选择合适的有机溶剂应考虑哪些主要因素？

3.简述超滤操作中，操作压力过高可能带来的不良后果。

4.为什么在亲和层析中选择合适的配体至关重要？

五、计算题（每小题6分，共12分。请列出计算步骤并给出最终答案。）

1.某物质在两相（水相和有机相）中的分配系数K=2。若水相中该物质浓度为0.1mol/L，问需要多少有机相才能将其80%萃取到有机相中？

2.已知某超滤膜的截留分子量为10kDa。有一蛋白质混合物，其中含有A蛋白（分子量8kDa）和B蛋白（分子量25kDa）。假设A、B蛋白在溶液中的初始浓度均为1g/L。若将此混合物通过该超滤膜进行浓缩，不透过液（浓缩液）的体积为100mL，计算浓缩液中的A、B蛋白浓度。（假设超滤过程无蛋白损失）

六、论述题（10分。请结合实例，论述在生化分离过程中，如何根据目标物质和混合物的特性选择合适的分离技术。）

试卷答案

一、选择题

1.C

2.D

3.B

4.C

5.C

6.C

7.C

8.A