2026届高三生物二轮复习课件：专题八　专题强化练　基因工程及其应用.pptxVIP

第一部分专题八专题强化练;答案;;;一、选择题(每小题只有一个选项符合题目要求。)

1.(2025·青岛二模)普通水稻含铁量极低，研究人员通过改良相关基因，培育出了铁含量比普通水稻高60%的转基因水稻。图1为改良基因及Ti质粒的示意图，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点，图2为后续培养过程。下列叙述正确的是;A.需用限制酶XmaⅠ和NheⅠ对Ti质粒进行切割

B.培养基2与培养基3加入的生长素和细胞分裂素比例不同

C.在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中一定含有改良基因

D.筛选含重组质粒的农杆菌时，应该在培养基中加入β-半乳糖苷，目标

菌落为蓝色;由图1可知，改良基因的左侧和右侧分别是用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割后产生的黏性末端，因此将改良基因和Ti质粒连接时，需用限制酶XmaⅠ和BglⅡ对Ti质粒进行切割，以便产生与改良基因两端相同的黏性末端，A错误；;图2中愈伤组织经再分化过程形成转基因水稻，培养基2与培养基3的区别是加入的生长素和细胞分裂素比例不同，B正确；

在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中不一定含有改良基因，原因是若农杆菌细胞中导入的是未携带改良基因的质粒，其含有氨苄青霉素抗性基因，也能在含氨苄青霉素的培养基中生长，C错误；;LacZ基因编码产生的酶能分解β-半乳糖苷，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。构建重组质粒时，LacZ基因的结构被破坏，含重组质粒的农杆菌不能分解β-半乳糖苷，菌落为白色。可见，筛选含重组质粒的农杆菌时，应该在培养基中加入β-半乳糖苷，目标菌落为白色，D错误。;2.(2025·安徽，15)质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X－gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是;A.使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌

落数

B.如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的

菌株

C.因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白

的菌株

D.若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了

大肠杆菌;使用氯化钙处理大肠杆菌，可使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数，A正确；

如果筛选平板中仅含卡那霉素，能生长出的菌落都具有卡那霉素抗性，白色菌落可能导入了重组质粒(含目的基因)，筛选平板因未加入X－gal无法检验β-半乳糖苷酶基因是否被破坏，也可能是导入了未重组的质粒K，所以不可判定该白色菌落为含目的基因的菌株，B正确；;筛选平板中长出的白色菌落，可能导入了重组质粒(含目的基因)，但导入的目的基因不一定成功表达目标蛋白，不能仅仅因为是白色菌落就判定其为表达目标蛋白的菌株，C错误；

若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌，因为自身环化的质粒K中β-半乳糖苷酶基因完整，能表达活性β-半乳糖苷酶，分解X－gal进而形成蓝色菌落，D正确。;3.常见PCR只能扩增两引物之间的DNA序列，要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列，可用反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。下列叙述错误的是;A.酶切阶段，L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列

B.环化阶段，可选用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶

C.图中引物，应选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对

D.PCR扩增，将温度调至72℃的目的是使引物与模板链结合;在酶切阶段，已知序列L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列，不然会将已知序列L切断，造成序列识别混乱，A正确；

T4DNA连接酶或E.coliDNA连接酶都可以用来连接黏性末端，因此环化阶段，可选用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶，B正确；;PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3′端通过碱基互补配对结合，为保证延伸的是已知序列两侧的未知序列，应选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对，C正确；

PCR扩增中，将温度调至72℃的目的是使耐高温的DNA聚合酶发挥作用，将4种脱氧核苷酸根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，D错误。;4.PM是一种致病真菌，其致病性可能与SKN7基因有关。科研人员将SKN7基因与pMD18-T载体进行拼接后导入受体菌，以便研究SKN7基因的功能。在SKN7基因扩增过程中Taq酶会;A.构建重组质粒过程中所用到

的甲酶为EcoRⅤ，乙酶为

DNA连接酶

B.上述方法构建