2026年卫生专业技术资格考试微生物检验技术(中级384)基础知识巩固要点详解.docxVIP

卫生专业技术资格考试微生物检验技术(中级384)基础知识梳理重点

一、微生物学基础

1.微生物分类与结构

原核微生物：细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体

细菌基本结构：细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质、核质（无核膜）、核糖体（70S）

特殊结构：荚膜（抗吞噬）、鞭毛（运动）、菌毛（黏附）、芽孢（耐热、抗逆）

真核微生物：真菌（酵母、霉菌）、原生动物、藻类

非细胞型微生物：病毒（无细胞结构，含DNA或RNA）、噬菌体、亚病毒（类病毒、卫星病毒、病毒）

2.细菌形态与染色

基本形态：球菌、杆菌、螺形菌

革兰染色法（Gramstaining）

步骤：结晶紫初染→碘液媒染→酒精脱色→复红复染

结果：G?（紫色）、G?（红色）

意义：分类、指导抗生素选择（如青霉素对G?作用强）

抗酸染色：用于分枝杆菌（如结核分枝杆菌），呈红色（齐-尼氏染色）

3.细菌生长与代谢

营养需求：碳源、氮源、无机盐、生长因子、水

氧气需求分类：

专性需氧菌（如结核分枝杆菌）

微需氧菌（如幽门螺杆菌）

兼性厌氧菌（如大肠杆菌）

专性厌氧菌（如破伤风梭菌）

培养基分类：

基础培养基、营养培养基、选择培养基（如SS琼脂）、鉴别培养基（如MAC）、增菌培养基

生长曲线：迟缓期、对数期（最适研究）、稳定期、衰亡期

二、免疫学基础

1.免疫系统组成

固有免疫：皮肤黏膜屏障、吞噬细胞（中性粒、巨噬）、NK细胞、补体系统、炎症反应

适应性免疫：T细胞（Th、Tc）、B细胞、抗体（Ig）、MHC分子

2.抗原与抗体

抗原：具有免疫原性（诱导免疫应答）和反应原性（与抗体结合）

完全抗原（如蛋白质）、半抗原（如青霉素）

抗体（免疫球蛋白）：

IgG：唯一能通过胎盘；主要血清抗体

IgM：初次应答最早产生；五聚体

IgA：黏膜免疫主要抗体

IgE：与I型超敏反应、寄生虫免疫相关

IgD：B细胞表面受体

3.补体系统

三条激活途径：经典途径（抗原-抗体复合物）、旁路途径（微生物表面）、MBL途径（甘露糖结合凝集素）

生物学功能：溶菌、调理吞噬、免疫黏附、炎症介质释放

4.超敏反应

类型

名称

机制

代表疾病

I型

速发型

IgE介导，肥大细胞脱颗粒

过敏性鼻炎、哮喘、青霉素过敏

II型

细胞毒型

IgG/IgM攻击细胞表面抗原

输血反应、新生儿溶血病

III型

免疫复合物型

抗原-抗体复合物沉积

系统性红斑狼疮、血清病

IV型

迟发型

T细胞介导，无抗体参与

结核菌素试验、接触性皮炎

三、临床微生物学检验

1.标本采集与处理

原则：无菌操作、及时送检、正确容器、标注信息

常见标本：

血液（血培养）：发热寒战时采集，需氧+厌氧瓶

痰液（咳痰或支气管灌洗）：清晨第一口，挑取脓性部分

尿液：中段尿、导尿、膀胱穿刺

脑脊液（CSF）：穿刺后立即分装（3管）

粪便：腹泻患者，冷藏送检（如沙门、志贺）

运输：某些标本需特殊运输（如淋球菌用羊膜运输管）

2.细菌分离培养与鉴定

接种方法：划线分离法、倾注平板法、涂布法

生化试验：

IMViC试验：大肠杆菌（++–），产气杆菌（–++）

氧化酶试验：革兰阴性杆菌（如假单胞菌阳性，肠杆菌阴性）

触酶试验：葡萄球菌阳性，链球菌阴性

乳糖发酵（MAC琼脂）、糖发酵管、尿素酶试验（幽门螺杆菌阳性）

自动化系统：VITEK、BDPhoenix、MALDI-TOFMS（质谱快速鉴定）

3.药物敏感性试验（AST）

纸片扩散法（K-B法）：测量抑菌圈直径，参照CLSI标准判断敏感（S）、中介（I）、耐药（R）

MIC测定：肉汤稀释法、E-test条

常见耐药机制：

β-内酰胺酶（ESBLs、AmpC、碳青霉烯酶）

MRSA（甲氧西林耐药金葡菌）：mecA基因

VRE（万古霉素耐药肠球菌）：vanA/vanB基因

CRAB（碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌）

4.特殊病原体检验

病原体

标本

检测方法

备注

结核分枝杆菌

痰、CSF、组织

抗酸染色、罗氏培养（8周）、XpertMTB/RIF（PCR+耐药）

睡眠结核需培养3-8周

淋病奈瑟菌

尿道/宫颈分泌物

革兰阴性双球菌、巧克力琼脂、核酸扩增（NAAT）

低温易死亡

沙门氏菌/志贺氏菌

粪便

SS、HE琼脂、血清凝集

志贺无动力、无H抗原

布氏杆菌

血液

需CO?、巧克力琼脂、试管凝集试验（Wright法）

“波浪热”病原体

真菌

皮屑、指甲、痰

氢氧化钾涂片、沙氏培养基、真菌培养

常见：白色念珠菌、曲霉

病毒

血清、咽拭、脑脊液

ELISA、PCR、病毒分离（细胞培养）、抗原检测

重视核酸检测（如HBV、HCV、HIV、SARS-CoV-2）

四、病毒学基础

1.病毒基本特征

结构：核心（DNA/RNA）+衣壳+包膜（部分病毒有）

复制周期：吸附→穿入