病理学技术(初级(士)106)相关专业知识卫生专业技术资格考试梳理重点精析(2026年).docxVIP

卫生专业技术资格考试病理学技术(初级(士)106)相关专业知识巩固重点

一、基础理论知识

1.1细胞与组织基础

细胞结构：细胞膜、细胞核、细胞器（线粒体、内质网、高尔基体等）的结构与功能

基本组织：上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织的分类与特征

组织损伤与修复：变性、坏死、凋亡的形态学特点；再生与修复机制

1.2炎症与肿瘤基础

炎症基本病理变化：变质、渗出、增生

炎症细胞：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞的形态与功能

肿瘤基本特征：异型性、分化程度、浸润与转移

肿瘤分级与分期：WHO分级系统、TNM分期基本原则

二、标本处理技术

2.1标本接收与固定

接收程序：核对申请单、标本信息、检查标本状态

固定原则：及时固定、足量固定液、固定容器选择

常用固定剂：

10%中性缓冲福尔马林（首选）

酒精固定液（95%乙醇）

Bouin液（睾丸、乳腺）

Zenker液（骨髓）

Carnoy液（糖原保存）

固定时间：一般标本24-48小时，活检标本6-12小时

2.2脱水与透明

脱水程序：梯度酒精脱水（70%→80%→95%→100%）

透明剂：二甲苯（最常用）、氯仿、甲苯

注意事项：彻底脱水，防止组织收缩过度

2.3浸蜡与包埋

浸蜡温度：58-60℃石蜡，时间2-4小时

包埋方向：根据组织类型确定包埋面（如皮肤应垂直于表皮包埋）

包埋注意事项：防止气泡产生，编号准确

三、常规染色技术

3.1HE染色技术

染色原理：

苏木素：碱性染料，染细胞核（蓝色）

伊红：酸性染料，染细胞质和间质（红色）

染色步骤：

脱蜡→水化→苏木素染色→分化→返蓝→伊红染色→脱水→透明→封片

关键控制点：

苏木素染色时间：5-15分钟

盐酸酒精分化：1-3秒

伊红染色时间：1-3分钟

常见质量问题：

切片脱落（防脱片处理不足）

染色不均（脱蜡不彻底）

核浆共染（分化不当）

3.2苏木素配制方法

Harris苏木素：

苏木素2.5g+无水乙醇25ml+硫酸铝钾50g+蒸馏水500ml+氧化汞1.25g

需”煮开放紫”熟化，过滤后使用

四、特殊染色技术

4.1结缔组织染色

染色方法

染色对象

结果

临床应用

Masson三色染色

胶原纤维、平滑肌

胶原（蓝/绿），肌纤维（红）

肝纤维化、心肌病变

VanGieson染色

胶原纤维、肌纤维

胶原（红），肌纤维（黄）

一般结缔组织染色

网状纤维染色（Foot法）

网状纤维

黑色

肿瘤鉴别、骨髓活检

4.2微生物染色

抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）：

染结核分枝杆菌、麻风杆菌

结果：抗酸菌（红色），背景（蓝色）

革兰氏染色：

细菌分型（G+菌紫色，G-菌红色）

真菌染色（PAS法）：

真菌（紫红色），背景（绿色/蓝色）

4.3糖类物质染色

PAS染色（过碘酸-Schiff反应）：

原理：过碘酸氧化→Schiff试剂反应

阳性物质：糖原、黏蛋白、真菌

结果：阳性（紫红色），核（蓝色）

4.4色素与脂质染色

脂肪染色（苏丹Ⅲ/Ⅳ）：

冷冻切片，脂肪（橘红色）

含铁血黄素染色（普鲁士蓝反应）：

三价铁（蓝色）

黑色素染色（Masson-Fontana法）：

黑色素（黑色）

五、酶组织化学技术

5.1常用酶染色

碱性磷酸酶（ALP）：钙-钴法

酸性磷酸酶（ACP）：硝酸铅法

非特异性酯酶：α-醋酸萘酯法

琥珀酸脱氢酶（SDH）：硝基蓝四氮唑法

5.2染色要点

新鲜组织，快速冷冻

避免固定剂影响酶活性

控制反应温度与时间

设立阳性对照和阴性对照

六、免疫组织化学技术

6.1基本原理

抗原抗体特异性结合

标记系统：酶标、荧光素标、金标

显色系统：DAB（棕色）、AEC（红色）

6.2操作流程

切片处理：防脱片→脱蜡→抗原修复

抗原修复：

酶消化法（胰蛋白酶、胃蛋白酶）

热修复（高压锅、微波、水浴）

阻断：内源性过氧化物酶阻断（3%H?O?）

抗体孵育：一抗→二抗→显色

显色与复染：DAB显色→苏木素复染

6.3关键质量控制

阳性对照：已知阳性组织

阴性对照：PBS替代一抗

内源性对照：组织内已知抗原表达

常见问题：

假阳性（非特异性染色、内源性酶）

假阴性（抗原丢失、抗体失效）

6.4常用标记物

上皮来源：CK、EMA

间叶来源：Vimentin

淋巴造血：CD20、CD45RO、CD3

神经内分泌：Syn、CgA、NSE

增殖活性：Ki-67

激素受体：ER、PR

七、细胞学技术

7.1标本采集

脱落细胞学：

胸腹水、痰液、尿液、脑脊液

采集后2小时内处理

细针穿刺细胞学（FNAC）：

甲状腺、乳腺、淋巴结等

制片迅速，避免干燥

7.2制片技术

直接涂片法：适用于液体标本

离心沉淀法：适用于少量细胞标本

液基细胞学（LCT）：细胞收集、