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基于同步辐射的单细胞生物效应红外显微光谱：技术、应用与展望

一、引言

1.1研究背景与意义

细胞作为生命活动的基本单位，对其深入研究一直是生命科学领域的核心任务。传统的细胞研究多集中于细胞群体层面，然而细胞之间存在显著的异质性，即使处于相同组织或器官中的细胞，其基因表达、蛋白质组成以及代谢特性等也可能存在差异。单细胞研究能够将每个细胞视为独立实体，研究其独特性质，从而揭示细胞间的差异和变化，为深入理解生命活动本质提供关键信息。例如在肿瘤研究中，单细胞测序技术揭示了肿瘤细胞的异质性和演化过程，有助于寻找新的治疗靶点和个性化治疗策略；在免疫学研究里，单细胞技术解析了免疫细胞的活化状态，助力免疫机制的探索。

同步辐射红外显微光谱技术，是将红外光谱技术与同步辐射光源相结合的新兴技术。红外光谱可同时表征有机和/或无机、结晶和/或无定形样品，而同步辐射光源具有高亮度和高空间分辨率的特性，赋予了该技术在分析小样品或小样品区域上的独特优势。对于单细胞生物效应研究，同步辐射红外显微光谱技术无需标记、非侵入性，还可同时展示胞内代谢物（组）特征，能够在单细胞水平上对细胞受到刺激（如辐射）后的生物分子变化进行快速定性和定量分析，为探究单细胞生物效应提供了有力工具，有助于解析各种慢性疾病和衰老的分子基础，推动生物医学领域的发展。

1.2国内外研究现状

在国外，许多科研团队积极开展基于同步辐射的单细胞生物效应红外显微光谱研究。例如，美国一些研究机构利用该技术研究细胞在药物作用下的代谢变化，通过对单细胞红外光谱的分析，识别出药物作用后细胞内生物分子的改变模式，为药物研发和作用机制研究提供了重要数据。欧洲的科研人员则聚焦于干细胞分化过程中的单细胞研究，借助同步辐射红外显微光谱技术，追踪干细胞在分化过程中生物分子的动态变化，揭示了干细胞分化的分子机制。

在国内，中国科学院上海高等研究院研究员吕军鸿课题组在单细胞红外成像技术研究方面取得了一系列进展。他们针对单细胞技术中不同批次处理和测量时引入的系统性技术偏差问题，发展了对单细胞红外光谱相似性进行评判的方法，为分析单细胞红外光谱数据提供了实验基准和理论依据。此外，还首次提出单细胞红外表型组的概念和表型分析策略，实现了对低浓度中药成分作用下肿瘤细胞的反应评价，为人类表型组研究提供了全新手段。中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所黄青研究员课题组利用傅里叶变换红外光谱及显微成像技术分析α粒子辐照后不同细胞的光谱差异，研究p53相关的细胞辐射效应，发现p53基因敲除使得细胞辐射抗性增加，阐明了p53在细胞辐射敏感性调节中的作用及特点。

1.3研究内容与创新点

本文主要研究内容包括搭建同步辐射软X射线单细胞辐射平台，利用该平台对宫颈癌细胞、结肠癌细胞进行软X射线辐照，运用同步辐射傅立叶变换红外显微光谱技术检测辐照后细胞的生物分子变化，从核酸、脂类、蛋白质等方面分析辐射对单细胞生物效应的影响。同时，对抑癌基因p53进行单细胞红外光谱研究，探究其在细胞辐射效应中的作用机制。此外，还对单细胞的衣藻进行软X射线透射全场成像的初步研究。

本研究的创新点在于，首次将同步辐射软X射线单细胞辐射与同步辐射傅立叶变换红外显微光谱技术相结合，系统地研究单细胞的辐射生物效应，从全新视角揭示辐射对单细胞生物分子的影响机制。在研究方法上，发展了针对单细胞红外光谱分析的新数据处理方法，提高了光谱分析的准确性和可靠性，为单细胞生物效应研究提供了更有效的技术手段。

二、同步辐射与红外显微光谱技术原理

2.1同步辐射原理与特性

同步辐射是相对论性带电粒子在电磁场的作用下沿弯转轨道行进时所发出的电磁辐射。其产生过程基于电动力学理论，当带电粒子加速运动时，会以电磁波的形式辐射能量。在电子同步加速器中，高能电子在磁场作用下做回旋运动，此时电子会沿切线方向发出光辐射，这便是同步辐射，又被称为同步加速器辐射。

同步辐射具有一系列独特的特性，使其在科学研究中具有重要价值。首先，它的光谱连续且范围宽，由于是由非束缚态电子辐射产生，其光谱覆盖了从远红外、可见光、紫外直到硬X射线（10?～10?1埃）的广阔范围。这种宽光谱特性使得同步辐射能够满足不同学科、不同实验对光源波长的多样化需求，例如在材料科学中，可利用不同波段的同步辐射光研究材料的电子结构、晶体结构等；在生命科学领域，能用于生物分子结构和功能的研究。

其次，同步辐射的辐射强度高，在真空紫外和X射线波段，它能提供比常规X射线管强度高103～10?倍的光源，相当于在几平方毫米面积上有100千瓦的能量。高强度的光源为研究一些微弱信号或低浓度样品提供了可能，比如在痕量元素分析中，能够检测到样品中极低含量的元素，提高分析的