《野生大豆种质遗传完整性检测技术规程》.docxVIP

ICS65.020.01CCSB05

SAASS

团体标准

T/SAASS329—2026

野生大豆种质遗传完整性检测技术规程

Technicalcodeofpracticeforgeneticintegritytestingofwildsoybeangermplasm

2026-02-11发布2026-02-11实施

山东农学会发布

I

T/SAASS329—2026

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由山东省农业科学院提出。

本文件由山东农学会归口。

本文件起草单位：山东省农业科学院。

本文件主要起草人：王栋、夏晗、李娜娜、杨永义、李润芳、宫永超。

T/SAASS329—2026

2

野生大豆种质遗传完整性检测技术规程

1范围

本文件规定了野生大豆种质遗传完整性检测的不同生活力群体的获取、SSR标记分析、结果统计与判定方法等技术要求。

本文件适用于野生大豆种质遗传完整性的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T3543.4农作物种子检验规程第4部分：播种质量发芽试验

GB4404.2粮食作物种子第2部分：豆类

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

遗传完整性geneticintegrity

种质原始遗传组成状态，即在繁殖保存过程中要使其群体的遗传结构得到完全的保持，包括基因型频率分布及各位点等位基因频率分布和其原始群体一致。

3.2

种质遗传完整性变化changesingeneticintegrityofgermplasm

种质贮藏过程中的遗传变化以及种质繁殖后其后代群体的遗传组成与亲代种质群体相比较发生了变化。

3.3

遗传多样性指数geneticdiversityindex

用于量化一个种群或物种内部遗传变异丰富程度和分布均匀程度的数学指标，指数越高表明明遗传多样性越丰富。

3.4

香农指数shannonindex

用于衡量遗传多样性或种群内基因多样性的指标，它量化了种群中不同基因型或等位基因的丰富度和均匀度，指数值越高，说明种群内的遗传多样性越丰富，基因分布越均匀。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

PCR:聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction)

SSR:简单重复序列(SimpleSequenceVepeat)

5不同生活力群体的获取

5.1材料准备

3

T/SAASS329—2026

以播种、田间管理、收获及成熟度一致的野生大豆种子为试验材料，至少3000粒种子。野生大豆种子质量应符合GB4404.2的规定。

5.2破除硬实

用布袋包裹野生大豆种子，放入液氮中浸泡4min,然后将种子取出来在室温25℃下使其自然升温。

5.3平衡含水量

将野生大豆种子放入人工气候箱中进行种子含水量平衡，平衡条件是相对湿度为45%,温度为25℃,时间为30d,测定种子含水量，直至7.3%～7.5%,若种子含水量达不到此标准，相同条件下继续平衡。

5.4密封包装

将野生大豆种子平均分成若干份，每份用铝箔袋真空密封包装，即为一个处理群体，约300粒。每个处理群体将用于之后的生活力检测、繁殖更新和SSR标记分析。

5.5人工老化

采用倒序法进行人工老化，每隔2周进行一个处理群体的人工老化试验，将铝箔袋密封包装后的大豆种子放置于人工老化箱内恒温老化，温度为40℃,试验结束时所有处理群体一起取出，以未经过老化的处理群体作为对照，人工老化时间视大豆种质及所需的生活力梯度而定。

5.6含水量再平衡

人工老化结束后，在25℃下将所有处理密封平衡2d,可获得野生大豆不同生活力的亲代群体。

5.7亲代生活力检测

亲代群体的发芽试验应按照GB/T3543.4的规定执行，并统计每个群体的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数等生活力指标。

5.8亲代繁殖更新

将不同生活力亲代群体的野生大豆进行田间繁殖更新，行距0.5m,株距0.1