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- 2026-02-12 发布于河南
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第2课时微生物的培养技术及应用
课标要求1.获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。2.阐明在发酵工程中灭菌是获得
纯净的微生物培养物的基础。3.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品和无菌区域不
被微生物污染的技术。4.举例说明通过调整培养基的配方可有目的的培养某种微生物。5.概述
平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。6.概述稀释涂
布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
考点一微生物的培养技术及应用
1.培养基的配制
(1)培养基的概念、用途和类型
①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
②用途:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
液体培养基
③种类:按物理性质分↓加入凝固剂,如琼脂
固体培养基
(2)培养基的配方
①主要营养物质:水、碳源、氮源、无机盐。
②其他条件:pH、特殊营养物质和氧气。如下表:
微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物
pH调至中性
特殊需求添加维生素pH调至酸性无氧
或弱碱性
2.无菌技术
(1)目的:获得纯净的微生物培养物。
(2)关键:防止杂菌污染。
(3)消毒与灭菌的比较
项目消毒灭菌
作用强度较为温和的理化因素强烈的理化因素
作用程度杀死物体表面或内部一部分微生物杀死物体内外的所有微生物
芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭
适用对象实验操作的空间、操作者衣着和双手微生物培养器皿、接种用具和培养基等
常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法等湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法等
(4)注意事项
①实验操作时,应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
②为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
3.微生物的纯培养
(1)概念辨析
(2)酵母菌纯培养的操作步骤
(3)平板划线法操作步骤
下图是平板划线操作的示意图,据图回答下列问题:
(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤:d→b→f→a→e→c→h→g。
(2)在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
提示需要。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感
染操作者。
(3)在第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?
提示划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能
使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
(4)接种结束后,为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养,未接
种的培养基表面如果有菌落生长,说明了什么?
提示培养未接种的培养基的作用是对照,未接种的培养基经过培养后无菌落生长,说明培
养基的制备是成功的;若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底,或培养基被污染了,需要重
新制备。
1.(2023·河北邢台高三模拟)在实验室培养微生物,需要人为地为微生物提供适宜的营养和环
境条件。下列关于培养基配制的说法正确的是()
A.培
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