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- 2026-02-17 发布于广东
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卫生专业技术资格考试病理学技术(初级(士)106)专业实践能力梳理要点
一、specimen收集与处理
1.切取原则
快速、准确、完整:保证标本在最佳时期内进行切取,避免自溶、腐败。
依据临床诊断要求:根据主送科室和临床描述确定切取范围和深度。
保证代表性:切取具有代表性、病灶最明显或主要嫌疑区域的组织。
2.标本固定
及时固定:离体后立即浸入10%中性缓冲福尔马林(或相应固定液)中。
完全浸没:确保标本各部分均被固定液浸没,无气泡。
固定液比例:一般使用10%中性缓冲福尔马林。
固定时间:根据组织类型和大小决定,一般常规组织固定需24-48小时。
3.标本识别与标记
唯一标识:每例标本必须有独特的标本号,贯穿采集、处理、检查、报告、存档全过程。
信息核对:核对床号、姓名、性别、标本部位、临床诊断、主送科室等临床信息。
标记方法:使用不易褪色的马克笔在标本、标签上清晰标记标本号。
防止混淆:标本容器、标签、蜡块瓶等均需统一标识,防止混淆和错误。
4.特殊标本处理
活检标本:如需要手足活检,需用胰岛素或利多卡因局部浸润麻醉。
小活检/印片:如为组织印片,需及时固定(如95%乙醇或10%福尔马林)。
骨骼标本:需用流水冲洗血迹,置于含尿液或相应溶液的容器中浸泡脱钙(如乙二醇)。
肿物标本:较大肿物需分块固定,记录各块位置关系。
与临床沟通:如有特殊检查要求(如免疫组化、快速冰冻),需提前与临床沟通并注明。
二、routinehistopathologicaltechnique(HE染色)
1.制作流程
固定:按上述要求固定。
脱水:梯度乙醇脱水(如70%,80%,95%,100%)。
浸泡:二甲苯透明(两次,每次20-30分钟)。
包埋:石蜡包埋,确定包埋方向和厚度(通常2-4mm)。
切片:载玻片准备,切片机切片(厚度4-5μm)。
黏片:切片浸入50%乙醇,涂布中性树胶,干燥。
烤片:烤片机温烤(如56-60℃,45分钟-1小时)。
脱蜡:梯度石蜡脱至无色透明。
水化:梯度乙醇水化(100%,95%,85%,75%,70%,蒸馏水)。
染色:
苏木素染色(Hematoxylin):染色(如1-3分钟),分化(如1-2秒洗涤),蓝化(蒸馏水或氨水/无色孔雀绿)。
伊红染色(Eosin):染色(如30-60秒)。
脱水:梯度乙醇脱水(95%,100%)。
透明:二甲苯透明(两次,每次5-10分钟)。
封片:中性树胶封片,盖片。
脱水透明/封片:最终透明处理,封片。
2.质量控制
固定度:固定不充分或过久均影响染色效果(固定差导致细胞肿胀,固定久导致细胞收缩、结构破碎)。
脱水脱蜡:脱蜡不净会导致透明度差,染色不均;水化不彻底会导致染色困难。
温度控制:烤片温度过高或过低、时间过长或过短均影响切片质量。
染色时程:苏木素染色和分化时间需严格控制,时间和浓度影响染色深浅。
pH值影响:缓冲液pH值影响染色效果,需使用合适pH的缓冲液。
三、frozensectiontechnique(快速冰冻切片)
1.适应症与禁忌症
适应症:术中快速诊断(肿瘤良恶性判断、分级、有无脉管侵犯等),指导手术。
禁忌症:需要精细解剖、标记、定位或非肿瘤性病变。
2.操作流程
标本要求:新鲜、无出血、无坏死、无污染。
预处理:如为脂肪组织,需用生理盐水冲洗吸除脂滴。
冷冻:快速冷冻(如直接置于液氮罐或冷冻台),避免冻裂。
切片:冷冻切片机切片(刀冷锋需锐利)。
染色:
苏木素染色:染色(如30-60秒),分化(如1-2秒洗涤),蓝化(蒸馏水或No.1或2蓝化液)。
伊红染色:染色(如30-60秒)。
脱水透明:梯度乙醇脱水(95%,100%),二甲苯透明(较短时间,如3-5分钟)。
封片:苯甲酸丁酯或中性树胶封片。
3.注意事项
冷冻速度:需快速冷冻形成冰晶,避免细胞损伤。
切片厚度:较厚,通常6-10μm。
染色差异:冰冻切片HE染色效果通常不如石蜡切片,染色较浅,结构模糊。
污染问题:术中操作易导致染色污染,需保持清洁。
诊断局限:冰冻切片适用范围有限,不得进行特殊染色。
四、autopsies(尸体解剖)
1.目的与意义
判断死因:明确死亡原因,是自然死亡、意外、自杀还是他杀。
明确疾病性质:确诊生前未确诊的疾病,或明确疾病自然发展过程。
评价医疗质量:分析疾病诊疗过程,总结经验教训。
教学与科研:为医学教学和科研提供宝贵材料。
2.解剖流程
尸体接收与登记:信息核对,检查尸体外观。
系统解剖:按器官系统进行解剖,观察大体病变并记录。
取材与编号:按解剖顺序选取有代表性、可疑病变或临床关注部位的标本,编号登记。
固定:按常规病理标本固定要求进行。
送检:送病理科进行后续处理。
3.
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