;专题九生物技术与工程;角度一PCR技术原理与条件
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1.PCR过程中不需要解旋酶,需要升高温度才能打开氢键,但此时的温度不会破坏磷酸二酯键。因此,双链DNA加热变性后变为单链,并未分解成单体。
2.PCR过程中使用的耐高温的DNA聚合酶需要Mg2+激活,因此PCR反应缓冲液中一般要添加Mg2+。
3.PCR的扩增结果:DNA分子以指数形式扩增(约为2n,其中n为扩增循环次数)。
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角度二PCR产物的电泳鉴定
1.原理:脱氧核苷三磷酸(dNTP)3′-C上的—OH被—H替换后转化为双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。在PCR反应体系中加入待测DNA片段、4种dNTP、1种32P标记的dd
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