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理论与实践

多重PCR检验致泻性大肠杆菌在细菌培养中的价值分析

文/苏锦红

摘要：目的：探究致泻性大肠杆菌（DEC）的临床检验中，应用多重聚合酶链式反应的效果，并进一步分析其在细菌

培养方面的价值。方法研究样本共计70例，均是疾病预防控制中心于2022年、2024年期间，在腹泻监测病例中选取的

DEC感染患者，本次研究的样本基因为患者体内的肠聚集性大肠杆菌（EAEC）、肠致病性大肠杆菌（EPEC）2种DEC的特异性，

所有患者均采用肛拭子、粪便进行增菌后用多重聚合酶链式反应（PCR）进行检测。结果：2024年检出病例共计55例（EAEC

阳性占47例、EPEC阳性占8例），2022年检出病例共计15例（EAEC阳性占6例、EPEC阳性占9例），经过综合诊断后，

研究对象的检测结果，在准确性方面均为100%。在不同时间段（10月份、11月份、12月份）方面，EAEC检出率分别为

81.82%、71.43%、75.00%；EPEC检出率分别为18.18%、28.57%、25.00%。在不同年龄段（＜5周岁、≥5周岁）方面，

EAEC检出率分别为65.63%、84.21%；EPEC检出率分别为34.38%、15.79%。结论：DEC的临床检验中，应用多重聚合酶

链式反应的效果较为理想，能够检验其中不同种类的菌群情况，进而为临床因其引发腹泻的治疗诊断提供真实的参考建议，

具有临床应用意义。

关键词：聚合酶链式反应；检验；致泻性大肠杆菌；细菌培养

致泻性大肠杆菌（Diarrheogenic文选取疾病预防控制中心2022年、排除标准：（1）送检样本存在

E.coli，DEC）是重要食源性致病菌，2024年腹泻监测病例中的70例DEC异常者；（2）中途自愿离开或样本

广泛分布于自然界，可通过多种途径感染患者展开研究，旨在进一步探讨脱落者；（3）研究期间参与其他研

感染人类，引发严重腹泻，威胁人类多重PCR技术在DEC检测中的应用究或药物治疗者。

健康[1]。因此，高效检测DEC对防优势，详细报告如下。（二）方法

控其感染意义重大。随着分子生物一、资料与方法多重聚合酶链式反应检测：（1）

学快速发展，多重聚合酶链式反应（一）一般资料样本准备：①样本采集：用肛拭子从

（PolymeraseChainReaction，PCR）研究样本共计70例，均是疾病患者粪便样本中收集大肠杆菌。②对

技术在DEC检测中广泛应用[2]。该预防控制中心于2022年、2024年期样本进行预处理：采用营养琼脂培养

技术利用脱氧核糖核酸（Deoxyribo间，在腹泻监测病例中选取的DEC基于无菌环境中进行恒温37℃培养，

NucleicAcid，DNA）聚合酶体外模感染患者，其中2022年15例：男性以富集目标细菌并去除杂质。（2）

拟天然DNA复制，特异性扩增目标9例，女性6例，年龄情况为6-46DNA模板制备：①菌悬液处理：取

DNA片段，实现指数级扩增[3]。自（25.45±17.36）周岁，2024年55例：培养后的菌液，进行适当的处理，如

1983年发明以来，PCR技术已成为男性29例，女性26例，年龄情况离心、洗涤等，以去除培养基成分和

病原体检测常规手段，国际上广泛应为6-45（25.26±17.14）周岁。两年杂质。②DNA提取：使用细菌DNA

用于食品安全和疾病监测领域[4]。国的样本情况差异无统计学意义（P＞提取试剂盒，按照说明书操作，提取

内相关研究起步较晚，但近年发展迅0.05）。细菌DNA作为PCR反应的模板。（3）

速，不少团队探索发现其临床应用价纳入标准：（1）DEC感染者；多重PCR反应体系建立：①引物设计：

值较为理想[5]。此外，不同