第二章蛋白质的定性定量分析课件.ppt

第二章

蛋白质的定性定量分析;蛋白质定性分析(qualitativeanalysis);蛋白质含量的测定方法（重点掌握）;蛋白质元素组成的特点;一、紫外光谱(A280)吸收法;原理;优点;二、考马斯亮蓝G-250检测法;所需时间;三、Lowry检测法;原理;优点;计算方法;四、BCA(二喹啉甲酸)检测法;优点;第二节蛋白质相对分子量测定;3.SDS基本原理;SDS作用：与蛋白牢固结合，当其浓度大于1mmol/L时，SDS与蛋白质的结合比例为1.4gSDS/1g蛋白质，由于十二烷基硫酸根带负电荷，使得样品中各种蛋白质与SDS形成的SDS-蛋白质复合物都带有相同密度的负电荷，掩盖了蛋白质分子间天然的电荷差异;4.SDS测定分子量的操作;;5.注意事项;二、凝胶过滤层析测定蛋白质的相对分子量;;3.注意事项;第三节

等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点;等电点(isoelectricpoint,pI);+;ReadyStripTMIPGStrips;BroadRange

pH3-10;注意事项;第四节

蛋白质的免疫印迹分析;印迹技术(blotting)是指将存在于凝胶中的生物大分子转移（印迹）于或直接放在固定化介质上并加以检测