rAAV包装手册
载体构建
根据实验目的和受试细胞选择载体,包装启动子在细胞内高效表达,具体操作详见“基
因调控”中“载体构建”部分。
质粒抽提
为了保证质粒DNA的高质量和纯度,可使用亲和柱DNA纯化法和氯化铯密度梯度离
心法,获取的质粒DNA溶解于pH7.5的TE缓冲液中待用。
AAV-293细胞培养
冻存细胞复苏
1)在培养瓶中加入10mLDMEM生长培养基,将细胞冻存管于冰上融化,转移至培养瓶
中;
2)室温下200×g离心3min,弃上清。加入5mL新鲜生长培养基,轻轻重悬细胞后,将
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