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胶原蛋白酶活性及纯度检测方法

1范围

本文件描述了微生物来源胶原蛋白酶活性及纯度的检测方法。

本文件适用于微生物来源胶原蛋白酶活性及纯度的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1胶原蛋白酶collagenase

在生理条件下水解胶原蛋白三螺旋区域肽键的蛋白酶。

3.2胶原蛋白酶活力单位activityunitofcollagenase

以N-[3-(2-呋喃基)丙烯酰基]-亮氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸（FALGPA）为底物，在pH7.5、25℃

以及钙离子存在的条件下，每分钟降解1μmol底物所需的酶量为1个活性单位。

4原理

4.1酶活性检测原理

FALGPA是一种类似于胶原蛋白一级结构的合成多肽，可以被所有已知的胶原蛋白酶水解。胶原蛋

白酶通过特异性水解FALGPA序列中的亮氨酸和甘氨酸之间的肽键，引起底物在345nm处