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生命科学研究与应用手册

第1章生命现象的观测与表征

1.1显微成像技术的原理与应用

光学显微镜利用可见光通过样本时发生折射和衍射来成像，其分辨率受阿贝衍射极限限制，通常难以区分小于200纳米的颗粒，因此需借助电子显微镜（EM）利用电子束的短波长特性突破这一极限，达到0.1纳米至5纳米的高分辨率。透射电子显微镜（TEM）通过电子束穿透超薄切片，利用底片或探测器记录电子密度分布，适用于观察细胞器的超微结构，如线粒体嵴的形态和蛋白质复合物的组装状态，其典型分辨率可达2.8埃。

扫描电子显微镜（SEM）利用聚焦的电子束扫描样品表面，激发二次电子和背散射电子成像，能呈现样品三维表面形貌，常用于观察细菌细胞壁、病毒颗粒及组织切片表面细节，空间分辨率可达1纳米。冷冻电子显微镜（Cryo-EM）采用液氮速冻将生物大分子固定在玻璃态冰中，消除晶体排列带来的误差，利用单颗粒分析技术和重构算法解析生物大分子在接近天然构象下的三维结构，已成为解析结构生物学研究的核心手段。光显微镜在活细胞成像中利用荧光染料标记特定分子，通过激光激发产生荧光信号进行成像，其成像速度快、生物相容性好，常用于观察细胞分裂、细胞周期进程及细胞内动态运输过程。

光遗传学技术结合光敏蛋白（如Channelrhodopsin）实现对外部光照的精确控制，允许科学家通过控制特定神经元或肌肉细胞的电活