蛋白质谷氨酰胺酶活力的测定方法 分光光度计法.pdfVIP

QB/TXXXX—XXXX

附录A

（规范性）

蛋白质谷氨酰胺酶活力的测定方法分光光度计法

A.1原理

蛋白质谷氨酰胺酶在一定条件下水解蛋白质中谷氨酰胺残基上的氨酰基，释放出游离的

氨，氨在硝普钠的催化作用下，以次氯酸钠为氧化剂，与苯酚生成蓝绿色的靛酚蓝染料，测

定反应液在630nm处的吸光值，吸光值与蛋白质谷氨酰胺酶活力成正比。

A.2试剂和溶液

除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的二级水。

A.2.1磷酸盐缓冲液（0.1mol/L，pH6.5）

称取十二水合磷酸氢二钠11.31g，二水合磷酸二氢钠9.44g，水溶解并定容至1000mL，

用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L柠檬酸溶液调节pH至6.5±0.05。

A.2.2Cbz-Gln-Gly-OH底物溶液（10mmol/L）

称取0.337gCbz-Gln-Gly-OH底物（CAS号6610-42-0）