琼脂糖凝胶电泳详细过程与步骤.ppt

琼脂糖凝胶电泳

Agarosegelelectrophoresis;天然琼脂（agar）:又名琼胶、菜燕、冻粉是从石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高聚物。;核酸凝胶电泳是分子克隆核心技术之一，用于分离、鉴定和纯化DNA或RNA片段;缺点

1.机械强度差，易破碎，浓度不能太低。

2.易被细菌污染，不易保存，临用前配制。

3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散，电泳后必须立即固定染色。

4.与PAGE相比，分子筛作用小，区带少。;一、实验目的

掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法;琼脂糖凝胶电泳法分离DNA，主要是利用分子筛效应，迁移速度与分子量的对数值成反比关系。因而就可依据DNA分子的大小使其分离。该过程可以通过把分子量标准参照物和样品一起进行电泳而得到检测。;三、实验材料、器具及药品

质粒DNA样品。

电泳仪，电泳槽，电子天平，移液器，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。

琼脂糖，1XTBE电泳缓冲液，溴化乙锭（EB），6X载样缓冲液;⑵用胶带将制胶板两端封好，插入适当梳子，将溶解的琼脂糖（约50℃）倒入，室温冷却凝固。;⑺将染色后的凝胶置于紫外透射检测仪上，盖上防护观察罩，打开紫外灯，可见到发出荧光的DNA条带。;;1、DNA分子的大小

双链DNA分子迁移的速率与其碱基对数的常用对数近似成反比；

2、琼脂糖浓度