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医疗行业检验科技师微生物检测分析手册

第1章微生物培养与分离

1.1培养基的选择与配制

首先需根据目标微生物的生长特性及实验室条件，从培养基手册中筛选出合适的营养类型。对于需氧菌，应选用液体或半固体培养基；对于厌氧菌，则必须使用厌氧罐或充氮环境下的特殊培养基。培养基的pH值直接影响微生物代谢活性，配制前需使用pH计精确校准至6.5-7.5之间（如血平板pH约7.2，麦康凯平板pH约6.6），以确保菌落形态清晰。

琼脂浓度是凝固微生物的关键参数，一般使用1.8%-2.0%的琼脂粉（如肉汤琼脂），过高会导致菌体破裂，过低则无法形成菌苔。营养成分需包含碳源、氮源、无机盐及维生素等，例如在营养肉汤中，乳糖作为唯一碳源需精确称量至1.0g/500ml，以筛选产酸菌。无菌操作是配制培养基的前提，配制过程必须在超净工作台内进行，所有器皿需经121℃高压蒸汽灭菌20分钟以上，防止杂菌污染干扰结果。

配制完成后需进行分装，若使用液体培养基，需分装至100-150ml的无菌试管中，并标记好灭菌日期和编号，避免交叉污染。

1.2无菌操作技术

操作前必须穿戴全套无菌防护用品，包括无菌手术衣、无菌口罩、无菌帽、无菌鞋套及无菌手套，严禁穿戴不洁衣物进入实验室。开启高压灭菌锅时，应先通入氮气（或空气）排出内部空气，防止氧气导致培养基氧化变质，并避