2025年医疗行业检验科检验师微生物检测鉴定手册.docxVIP

2025年医疗行业检验科检验师微生物检测鉴定手册

第1章微生物培养与分离鉴定

第一节常规培养基的配制与选择

在配制基础培养基时，需严格根据微生物生长需求选择碳源、氮源和无机盐，例如在制作营养琼脂（NA）时，必须使用葡萄糖作为唯一碳源，同时加入酵母浸粉提供氮源，并添加氯化钠（NaCl）至1.5%以维持渗透压平衡，防止微生物过度吸水膨胀。对于需要特殊代谢能力的微生物，如乳酸菌，配制培养基时需添加2%的葡萄糖和1%的硫酸铵，并在45℃恒温箱中培养24小时，以确保乳酸菌能够正常进行糖酵解反应并维持细胞形态稳定。

配制肉汤培养基时，应使用去离子水作为溶剂，加入10g/L蛋白胨和5g/L酵母提取物，并在115℃高压灭菌15分钟，以确保培养基中不含热原，适合用于细菌生理生化试验。制作血琼脂平板（BloodAgar）时，需将10g凝固的血琼脂粉与1000mL去离子水混合，随后在115℃高压灭菌15分钟，以提供丰富的营养物质并抑制部分革兰氏阴性菌的生长，便于后续分离观察。在配制巧克力琼脂（ChocolateAgar）时，需将10g凝固的巧克力琼脂粉与1000mL去离子水混合，并在50℃温箱中培养36小时，以释放琼脂中的热稳定酶，从而支持兼性厌氧菌如脑膜炎奈瑟菌的生长。

配制营养琼脂（NA）时，需将10g凝固的