【2026年整理】实验三枯草芽孢杆菌碱性磷酸酶.pptVIP

生物技术综合实验

南京师范大学生命科学学院

张茵

2010.3

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实验三、枯草芽孢杆菌

碱性磷酸酶的提取和酶活测定

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实验目的

学习盐析法提取碱性磷酸酶；

学习透析法脱盐；

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实验材料

菌种：枯草芽孢杆菌；

培养基：Tris培养基；

试剂：0.1MTris-HCl缓冲液（pH7.5），

1MMgCl2溶液，硫酸铵固体粉末，

0.1MTris-HCl缓冲液（pH9.5），40mMNPP溶液；

仪器：离心机、水浴锅；

其它材料：透析袋（14000Da）。

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实验原理

渗透压冲击法破裂细胞；

分级盐析法提取碱性磷酸酶；

透析法脱盐；

酶活测定的原理。

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渗透压冲击法破壁

原理：