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生物制药与细胞培养手册

第1章细胞培养基础理论与无菌操作规范

1.1细胞培养基本术语与分类

细胞培养是指将生物活性细胞置于适宜的培养基和环境中，使其在体外进行增殖、分化及代谢调节的过程。在此过程中，细胞通常被接种于含有特定营养成分和生长因子的培养基中，通过生物反应器或摇床提供氧气和营养。细胞分类主要依据其生长特性、起源及用途，常见的包括原代细胞（直接从生物体分离的细胞，如皮肤成纤维细胞）、细胞系（经多次传代后失去接触抑制特性的细胞，如HEK293细胞、HEP-G2细胞）以及细胞株（在特定条件下定向诱导出无限增殖能力的细胞系）。

培养基系统是细胞生长的核心，包括基础培养基（提供基本营养）、补充培养基（补充生长因子或激素）及选择培养基（通过添加抑制剂筛选特定细胞类型）。例如，使用DMEM培养基作为基础培养基，加入10%的胎牛血清以提供生长因子。细胞培养环境需严格控制在37℃、5%CO?或95%N?/5%CO?的环境中，以维持细胞代谢所需的pH值稳定。温度过高会加速细胞代谢导致死亡，过低则影响酶活性。细胞传代是指将贴壁细胞从原瓶转移到新瓶的过程，通常需稀释1:10或1:50，以控制细胞密度防止过度拥挤。若细胞贴壁过紧，可采用胰酶消化法将其从瓶壁剥离。

细胞复苏是将冻存的细胞解冻并重新接种到培养箱中的过程，需使用预热的培养基（如3