基因工程基本工具与操作程序概要.pdfVIP

第58讲工程的基本工具和基本操作程序

课程

1.阐明重组技术的实现需要利用限制性内切酶、连接酶和载体三种基本工具。

2.阐明工程的基本操作程序主要包括目的的筛选与获取、表达载体的构建、将目的导入受体细

胞和目的的检测与鉴定等步骤。

3.的粗提取与鉴定实验。

4.利用聚合酶链式反应（PCR）扩增片段并完成电泳鉴定，或运用软件进行虚拟PCR实验。

考点一工程的基本工具

1.工程的概念

提醒工程的理论基础

2.工程的基本工具

（1）限制性内切酶（简称限制酶）

提醒①将一个从分子上切割下来需要切两处，同时产生四个黏性末端或平末端。

②原核生物的限制酶不切割自身的是原核生物分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修

饰。

（2）连接酶

【拾遗】（选择性必修3P72旁栏思考）连接酶和聚合酶不是一回事。是①连接酶连接

的是两个片段，而聚合