2025年基因工程与生物制品手册.docx

2025年基因工程与生物制品手册

第1章基因工程与生物制品手册

1.1基因编辑技术原理与应用

CRISPR-Cas9系统机制解析：CRISPR-Cas9是一种利用向导RNA（gRNA）引导Cas9核酸酶在基因组特定位置切割DNA的机制。其核心是将gRNA与Cas9蛋白融合，使其能够识别并结合基因组中互补的DNA序列，从而形成PAM序列（通常位于切割位点上游3个碱基处，如NGG）。切割后，Cas9产生双链断裂（DSB），细胞启动两种主要的修复途径：非同源末端连接（NHEJ）和同源定向修复（HDR）。NHEJ过程缺乏模板，直接连接断裂末端，常导致插