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生物制药技术与生产工艺手册

第1章生物制药原料与辅料管理

1.1细胞培养用培养基体系

培养基是细胞培养的核心介质，其配方需严格遵循细胞株特性，例如CHO细胞通常使用含有20%葡萄糖和10%葡萄糖胺的DMEM基础培养基，以确保细胞在能量代谢和糖酵解途径中的正常生长。缓冲体系必须精确控制pH值稳定，常用碳酸氢钠-二氧化碳系统调节，在37℃、5%CO?环境下，pH值需维持在7.2-7.4之间，若偏离此范围，细胞分泌的乳酸会导致pH下降，影响培养效率。

渗透压调节是维持细胞体积的关键，使用10mM的蔗糖或甘露醇作为渗透压调节剂，可防止细胞在稀释过程中发生皱缩或肿胀，需通过紫外分光光度法测定最终渗透压值，确保在300-400mOsmol/kg范围内。抗生素添加遵循严格的无菌屏障原则，如青霉素-链霉素混合液需使用0.22μm滤膜过滤除菌，并加入20U/ml青霉素和100U/ml链霉素以预防细菌污染，添加量需根据培养基体积按比例计算。维生素与微量元素需精确配比，例如在L-谷氨酰胺培养基中，维生素B12的添加量通常为0.05-0.1μg/ml，钙离子需通过氯化钙溶液配制，浓度控制在0.1-0.2%以维持细胞骨架稳定性。

培养基的终浓度需经严格验证，例如葡萄糖终浓度设定为20g/L，需通过HPLC