2025年基因编辑与细胞培养技术手册_1.docxVIP

2025年基因编辑与细胞培养技术手册

第1章基因编辑工具原理与安全性评估

1.1CRISPR-Cas9系统机制与脱靶效应分析

CRISPR-Cas9系统利用向导RNA（gRNA）引导Cas9核酸酶在基因组特定位点产生双链断裂（DSB），从而实现基因敲除或修复；其核心优势在于设计灵活、成本低且易于规模化生产，广泛应用于基础研究和临床前药物筛选。脱靶效应是指Cas9或非特异性结合导致非目标位点发生切割的现象，是基因编辑过程中最需警惕的安全风险，可能导致非预期的基因突变或染色体易位，直接威胁实验动物及后续临床试验的准确性。

为评估脱靶效应，需通过全基因组测序（WGS）结合