实验四电泳技术-LDH-SDS-PAGE及western-blotting.ppt

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实验四电泳技术-LDH-SDS及western__blotting文档ppt;+;二、电泳迁移率;当分子达到动态平衡时,F=f

即QE=6πrηv

移项得v/E=Q/6πrη

v/E:表示单位电场强度时粒子运动速度,称

为迁移率,也称电泳速度,以?表示。

因此上式也可表示为:?=Q/6πrη;三、影响迁移率的因素;3.溶液的离子强度

缓冲液的离子强度越高,电泳速度越慢

一般在0.02-0.2mol/L。

4.电渗现象

在电场中液体对固体支持物的相对移动。

电泳介质多孔,且带有可解离的化学基团,

吸附正离子或负离子,使溶液相对带电。

应尽量避免选用有电渗作用的支持物。;四、电泳的分类;根据支持介质物理形状不同

(1)滤纸及其它纤维素薄膜电泳

(2)凝胶电泳

(3)粉末电泳

(4)线丝电泳

根据支持介质的装置形式

(1)平板式电泳

(2)垂直板式电泳

(3)连续式电泳

(4)圆盘电泳

根据pH连续性与否

(1)连续pH电泳

(2)非连续pH电泳;琼脂糖凝胶电泳:一般用于核酸的分离分析。

琼脂糖凝胶孔径度较大,对大部分蛋白质只有很

小的分子筛效应。

聚丙烯酰胺凝胶电泳:可用于核酸和蛋白质的

分离、纯化及检测。其分辨率较高。

聚丙烯酰胺和琼脂糖是目前实验室最常用的支持介质;五、琼脂糖

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