有机溶剂沉淀法分离超氧化歧化酶-生化分离技术.pptxVIP

学习目标了解有机溶剂沉淀法分离的原理；能够进行有机溶剂沉淀法操作。

重难点重点：了解常用有机溶剂的选择和计算；难点：了解有机溶剂沉淀法的影响因素。

有机溶剂沉淀法分离的原理1常用有机溶剂的选择和计算2目录有机溶剂沉淀法的影响因素3有机溶剂沉淀法操作注意事项4

一.有机溶剂沉淀法分离的原理利用与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇、丙酮等)能使蛋白质在水中的溶解度显著降低而沉淀的方法，称为有机溶剂沉淀。

一.有机溶剂沉淀法分离的原理有机溶剂引起蛋白质沉淀的主要原因是加入有机溶剂使水溶液的介电常数降低，因而增加了两个相反电荷基团之间的吸引力，促进了蛋白质分子的聚集和沉淀。有机溶剂引起蛋白质沉淀的另一种解释认为与盐析相似，有机溶剂与蛋白质争夺水化水，致使蛋白质脱除水化膜，而易于聚集形成沉淀。

一.有机溶剂沉淀法分离的原理沉淀原理1原理2静电作用脱水作用

二.常用有机溶剂的选择和计算1.有机溶剂的选择水溶性无限互溶介电常数小致变性小

二.常用有机溶剂的选择和计算1.有机溶剂的选择毒性小成本低

二.常用有机溶剂的选择和计算2.有机溶剂的剂量的计算?

三.有机溶剂沉淀法的影响因素1.温度

三.有机溶剂沉淀法的影响因素2.浓度蛋白质5~20mg/mL多糖1%到2%

三.有机溶剂沉淀法的影响因素3.pHpH溶解度低等电点杂质

三.有机溶剂沉淀法的影响因素4.金属离子复生合物0.05mol/L以下

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