核酸组织化学课件.pptVIP

核酸：

1.核糖核酸（RNA）：核仁和核糖体

2.脱氧核糖核酸（DNA）：核内的染色质或染色体

;Feulgen反应

1924年提出,特异性显示DNA分子形态学方法

DNA在酸性环境下水解,断开糖苷键,形成醛基

醛基再与shiff液中的碱性品红特异性结合,形成紫红色醌基;Feulgen反应

应用：

肿瘤细胞具有高增生的DNA含量,鉴别并协助诊断肿瘤的良恶性

细胞及原代培养细胞DNA分子的检测与鉴定;Feulgen反应

Schiff液的配制

0.05g碱性品红研细，溶于含0.5mL浓HCl的50mL水中，再加入0.5gNa2SO3固体，搅拌后，静置，直到红色褪去

;Feulgen反应步骤

1.石蜡切片

2.切片脱蜡入水

3.切片用1mol/LHCL冲洗

4.1mol/LHCL60℃温箱水解8min

5.室温1mol/LHCL冲洗

;Feulgen反应步骤

6.蒸馏水洗

7.暗处入Schiff液染色60min

8.亚硫酸钠溶液洗3次约6min

9.蒸馏水洗

10.脱水透明、封固。

;Feulgen反应注意事项

1.不能用含甲醛固定液，可用Carnoy固定液

2.尽量不用冰冻切片，减少非特异染色

3.控制盐酸水