凝胶电泳仪操作作业指导书.docVIP

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  • 2026-07-12 发布于江苏
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凝胶电泳仪操作作业指导书

一、设备概述与适用范围

凝胶电泳仪是分子生物学、生物化学等领域实验室常用的分析仪器,主要由电泳槽、电源、凝胶成像系统(可选)三部分组成。其工作原理是利用带电粒子在电场中向相反电荷电极移动的特性,通过凝胶的分子筛作用,将不同分子量、电荷数的生物大分子(如核酸、蛋白质)进行分离、鉴定与定量分析。

本指导书适用于琼脂糖凝胶电泳(核酸分析)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(蛋白质分析)的常规操作,涵盖从样品制备到结果分析的全流程,适用于科研实验室、医学检验机构、生物技术企业等场景的实验人员操作。

二、前期准备

(一)试剂与材料准备

凝胶相关试剂

琼脂糖/聚丙烯酰胺:根据实验需求选择合适类型。琼脂糖适用于核酸的分离,浓度通常在0.5%-2%之间,低浓度琼脂糖用于分离大分子核酸(如基因组DNA),高浓度用于分离小分子核酸(如引物、小片段DNA);聚丙烯酰胺常用于蛋白质或小片段核酸的精细分离,分为非变性和变性两种,非变性聚丙烯酰胺凝胶用于保持蛋白质天然构象,变性聚丙烯酰胺凝胶(如SDS)则用于根据分子量分离蛋白质。

电泳缓冲液:常用的有TAE(Tris-乙酸-EDTA)、TBE(Tris-硼酸-EDTA)缓冲液,用于核酸电泳;蛋白质电泳常用Tris-甘氨酸缓冲液、Tris-硼酸缓冲液等。缓冲液需提前配制并高压灭菌,储存于室温或4℃冰箱,使用前恢复至室温。

染色剂:核酸电泳常用溴化乙

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